上海交通大学谭在高获国家专利权
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龙图腾网获悉上海交通大学申请的专利一种提高大肠杆菌鲁棒性的重组菌及其构建方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN116179460B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-05-27发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202310091486.3,技术领域涉及:C12N1/21;该发明授权一种提高大肠杆菌鲁棒性的重组菌及其构建方法是由谭在高;孙文杰设计研发完成,并于2023-02-06向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种提高大肠杆菌鲁棒性的重组菌及其构建方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种提高大肠杆菌鲁棒性的重组菌及其构建方法;通过将甲基乙二醛合酶基因mgsA替换为来自酵母的截短的角鲨烯合酶基因tErg9;在此基础上将磷酸乙酰转移酶基因pta替换为来自酸热脂环酸芽孢杆菌的角鲨烯‑藿烯环化酶基因shc,人工引入一条外源人工合成非天然膜组分hopanoids途径,并对內源MEP途径关键限速酶进行人工调控。获得的重组菌细胞膜中包含全新的非天然膜组分,使其细胞膜得到重塑,重组工程菌的耐受性和产物合成能力得到显著提高。
本发明授权一种提高大肠杆菌鲁棒性的重组菌及其构建方法在权利要求书中公布了:1.一种目标化合物产量提高的重组大肠杆菌,其特征在于,所述重组大肠杆菌为引入了非天然膜组分hopanoids的重组大肠杆菌;非天然膜组分hopanoids的合成是通过大肠杆菌内源MEP途径结合引入的外源人工合成途径进行;所述目标化合物为长链脂肪酸、三羟基丙酸和间苯三酚;所述重组大肠杆菌的构建方法包括:(1)将大肠杆菌E.coliMG1655中的序列如SEQIDNO.1所示的甲基乙二醛合酶基因mgsA替换为序列如SEQIDNO.2所示的截短的角鲨烯合酶基因tErg9,并运用人工启动子策略上调tErg9的表达;(2)将步骤(1)中得到的大肠杆菌中的序列如SEQIDNO.3所示的磷酸乙酰转移酶基因pta替换为序列如SEQIDNO.4所示的角鲨烯-藿烯环化酶基因shc,并运用人工启动子策略上调shc的表达,得到重组工程菌;(3)对所得重组工程菌的内源MEP途径关键限速酶进行人工调控的步骤:将1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸合酶基因Dxs和异戊烯基焦磷酸异构酶基因idi的启动子分别替换为人工增强启动子M1-37和M1-46;所述M1-37的核苷酸序列如SEQIDNO.6所示,M1-46的核苷酸序列如SEQIDNO.7所示。
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