恭喜中山大学纪静芸获国家专利权
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龙图腾网恭喜中山大学申请的专利一种染色体压片结合原位杂交的简易操作方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119935691B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-06-06发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202510428579.X,技术领域涉及:C12Q1/6841;该发明授权一种染色体压片结合原位杂交的简易操作方法是由纪静芸设计研发完成,并于2025-04-08向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种染色体压片结合原位杂交的简易操作方法在说明书摘要公布了:本发明属于分子细胞遗传学及染色体工程技术领域,具体涉及一种染色体压片结合原位杂交的简易操作方法。本发明在染色体压片的甲醇冰醋酸固定的基础上进一步使用4%多聚甲醛处理进行双固定,使得染色体结构形态能够耐受90度以上的高温变形,与传统方法相比,能提供更清晰的染色体形态结构。同时,本发明还开发了相应的通用型杂交液体系和漂洗液体系,无需因为探针不同而需要摸索各种复杂的杂交退火流程和漂洗流程,与传统的染色体压片结合原位杂交技术相比,本发明具有更高的染色体结构形态清晰度,在保持杂交信号的同时,仍能在非信号区清晰观测到染色体断裂位置有助于为染色体相关遗传学分析研究提供技术支持。
本发明授权一种染色体压片结合原位杂交的简易操作方法在权利要求书中公布了:1.一种染色体压片结合原位杂交的简易操作方法,其特征在于,该方法用于非疾病诊断目的,包括以下步骤:S1、将脑组织用低渗缓冲液室温处理3-10分钟;S2、再用固定液室温固定10-20秒,所述固定液包括乙酸、甲醇和水;S3、往硅化盖玻片中加入40%-50%醋酸,再将脑组织转移至40%-50%醋酸中,并盖上未硅化的载玻片;S4、用力压住盖玻片,使脑组织散开,并使染色体伸展;S5、用液氮处理样品,翘起盖玻片,置于无水乙醇处理10-30分钟或者过夜;S6、取出载玻片在室温中晾干;S7、用2×SSC清洗样品,先在60%-80%乙醇中脱水7-15分钟,再在90%-97%乙醇中处理3-7分钟,晾干;S8、用4%多聚甲醛室温处理样品20-50min;S9、PBS漂洗,晾干;S10、将杂交液加入样品并覆盖盖玻片,所述杂交液包括50%甲酰胺、10%硫酸葡聚糖、2×SSC、0.5μM探针;S11、在90-95℃下变性2-5min;S12、随后迅速冷却至室温,并在室温湿润暗光下孵育0.5-2h或过夜;S13、用0.1×SSC清洗2-5次,每次10-20min;S14、用DAPI染色3-10分钟;S15、快速用2×SSC清洗,并使载玻片晾干;S16、用Vectashield封片并使用显微镜进行分析。
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