广东生态工程职业学院张立娜获国家专利权
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龙图腾网获悉广东生态工程职业学院申请的专利基于CRISPR/Cas12a的白头鹎冠状病毒检测试剂盒及其检测方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN118979125B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-06-06发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202411323637.4，技术领域涉及：C12Q1/70；该发明授权基于CRISPR/Cas12a的白头鹎冠状病毒检测试剂盒及其检测方法是由张立娜;范桂荧;李丽霞;陈淋淳;吴旭;刘昊设计研发完成，并于2024-09-23向国家知识产权局提交的专利申请。
本基于CRISPR/Cas12a的白头鹎冠状病毒检测试剂盒及其检测方法在说明书摘要公布了：本发明公开了基于CRISPRCas12a的白头鹎冠状病毒检测试剂盒及方法。具体公开了基于CRISPRCas12a的白头鹎冠状病毒检测体系，针对编码白头鹎冠状病毒spikeglycoprotein蛋白的S基因设计特异性gRNA，对靶序列进行荧光标记及切割后，利用荧光定量检测或免疫层析试纸条检测待测样品中是否含有白头鹎冠状病毒。本发明的白头鹎冠状病毒检测方法检测下限为3.43copyμL，与其他常见的鸟类病毒没有交叉反应，具有特异性。本发明的检测体系具有灵敏度高、特异性强、耗时短、不依赖大型实验设备等优势。
本发明授权基于CRISPR/Cas12a的白头鹎冠状病毒检测试剂盒及其检测方法在权利要求书中公布了：1.一种非疾病诊断目的的白头鹎冠状病毒的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：S1：提取待测样品中的RNA，并反转录为cDNA；S2：步骤S1所获得cDNA为模板，利用核苷酸序列如SEQIDNO.3和SEQIDNO.4所示的引物进行RPA扩增反应，得到特异性扩增产物；S3：步骤S2中所获得的特异性扩增产物加入CRISPRCas12a检测体系，进行切割反应，获得切割产物；所述的CRISPRCas12a检测体系为每20μL的体系中含有10×NEBuffer2μL、500nMCas12a1μL、500nMssDNA报告系统1μL、300nMgRNA1μL、步骤S2所获得的特异性扩增产物2μL和H2O13μL；所述的ssDNA报告系统为ssDNAFQreporter或ssDNAFBreporter；所述的gRNA的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示；所述的ssDNA报告系统所修饰的核苷酸序列为TTATTATT；S4：利用荧光定量检测法或免疫层析试纸条检测切割产物中是否含有白头鹎冠状病毒基因。
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