江苏省中国科学院植物研究所周正雄获国家专利权
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龙图腾网获悉江苏省中国科学院植物研究所申请的专利一种调控大肠杆菌中四氢嘧啶合成的方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN119859649B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-07-11发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202510354628.X，技术领域涉及：C12N15/70；该发明授权一种调控大肠杆菌中四氢嘧啶合成的方法是由周正雄;汪仁;林俊杰;李洁;孙彬;李晓丹;刁季晨;李佳维设计研发完成，并于2025-03-25向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种调控大肠杆菌中四氢嘧啶合成的方法在说明书摘要公布了：本发明公开了一种调控大肠杆菌中四氢嘧啶合成的方法，涉及生物医药技术领域。本发明公开的调控大肠杆菌中四氢嘧啶合成的方法，将tisB毒蛋白的基因片段构建tisB毒蛋白表达载体pET28a+‑p2‑22‑tisB，转入合成四氢嘧啶的大肠杆菌工程菌中，获得自发抑制四氢嘧啶合成的大肠杆菌工程菌E.coliEctpET28a+‑p2‑22‑tisB，同时能够保证早期正常合成四氢嘧啶。所述tisB毒蛋白的基因片段的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示。前3轮发酵，四氢嘧啶的产量与对照工程菌相近；到第7轮之后，四氢嘧啶的产量急剧下降至2.575gL，在第二十轮发酵时，四氢嘧啶的产量为零。
本发明授权一种调控大肠杆菌中四氢嘧啶合成的方法在权利要求书中公布了：1.一种调控大肠杆菌中四氢嘧啶合成的方法，其特征在于，将tisB毒蛋白的基因转入能够合成四氢嘧啶的菌株中，获得多轮循环发酵后四氢嘧啶产量降低的工程菌，具体步骤包括： 1）将tisB毒蛋白的基因构建到pET28a+载体上，获得重组表达载体pET28a+-tisB；将组成型启动子2-22构建到重组表达载体pET28a+-tisB上，获得tisB毒蛋白表达载体pET28a+-p2-22-tisB； 所述tisB毒蛋白的基因的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示； 所述组成型启动子2-22的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示； 2）将50ng重组表达载体pET28a+-p2-22-tisB与能够合成四氢嘧啶的大肠杆菌感受态于冰上共同孵育30min后，42℃热击90s转化获得多轮循环发酵后四氢嘧啶产量降低的工程菌。
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