上海市第十人民医院朱小立获国家专利权
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龙图腾网获悉上海市第十人民医院申请的专利一种基于荧光条形编码免疫标记的细胞高通量成像方法和应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN116500261B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-07-15发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202310181763.X,技术领域涉及:G01N33/569;该发明授权一种基于荧光条形编码免疫标记的细胞高通量成像方法和应用是由朱小立;孙奋勇;潘秋辉;唐晓晨;毛东升;李文星设计研发完成,并于2023-03-01向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种基于荧光条形编码免疫标记的细胞高通量成像方法和应用在说明书摘要公布了:本发明公开了一种基于荧光条形编码免疫标记的细胞高通量成像方法和应用,采用基于HCR反应的荧光条形编码免疫标记信号放大方法构建细胞各蛋白对应的ADC复合物,通过抗体端识别靶标以及DNA端触发HCR报告信号,在细胞中对多种蛋白同时孵育标记并荧光成像,利用人工+计算机图像智能识别结合的细胞多色区分对多蛋白荧光成像进行区分及定量,用于体外肿瘤细胞中多蛋白成像检测和分析。本发明基于不同组合下荧光报告信号实现细胞多种蛋白同时成像,解决反复成像造成的操作繁琐、细胞变性等问题,同时结合人工与图像智能识别实现各蛋白的区分及定量分析,在多靶标、多组学分析领域具有重要应用价值。
本发明授权一种基于荧光条形编码免疫标记的细胞高通量成像方法和应用在权利要求书中公布了:1.一种基于HCR反应的荧光条形编码免疫标记信号放大方法,其特征在于,其构建方法包括:DBCO修饰的引发链DNA与叠氮修饰的抗体进行交联,合成抗体引物复合体,所述引发链DNA作为T链,T链特异性触发HCR反应,输出的荧光信号作为报告标签对靶标进行标记,得到基于HCR反应的荧光条形编码免疫标记信号放大方法; HCR反应元件为四个具有茎环结构的发夹DNA链H1、H2、H3和H4,其序列分别如SEQIDNO:1-4所示,3’端修饰荧光基团分别是PacificBlue、FAM、TAMRA和Cy5,激发波长分别为405nm、488nm、560nm和633nm,分别用蓝、绿、黄和红色进行伪彩标记,T链序列如SEQIDNO:5所示,通过颜色或比例的不同组合方式产生的不同情况作为各靶标的报告标签,对不同靶标输出信号差异化区分。
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