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云南农业大学魏红江获国家专利权

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龙图腾网获悉云南农业大学申请的专利一种八基因编辑异种器官移植供体猪的构建方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119177256B

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-07-25发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202311457371.8,技术领域涉及:C12N15/85;该发明授权一种八基因编辑异种器官移植供体猪的构建方法是由魏红江;角德灵;赵恒;王娇祥;徐凯祥;赵红业;郭建雄;魏太云设计研发完成,并于2023-11-03向国家知识产权局提交的专利申请。

一种八基因编辑异种器官移植供体猪的构建方法在说明书摘要公布了:本发明涉及一种八基因编辑异种器官移植供体猪的构建方法,属动物生物技术领域。在野生型猪胎儿成纤维细胞系中,利用CRISPRCas9基因编辑技术敲除GGTA1、β4GalNT2、CMAH基因,转入hCD39、hCD46、hCD55、hCD59、hTBM人源化基因,结合体细胞克隆技术,构建GTKOβ4GalNT2KOCMAHKOhCD39hCD46hCD55hCD59hTBM八基因编辑克隆猪,进一步通过基因型、mRNA、蛋白表达鉴定及功能分析,获得八基因编辑异种器官移植供体猪。本发明解决了多基因编辑异种器官移植供体猪生产难度大、效率低、供体猪成活率低的技术难题,最大限度地解决了异种器官移植过程中面临的免疫排斥反应及补体失调共性问题,为更有针对性地开发适合不同组织器官异种移植供体猪奠定了基础,对推动异种器官移植临床转化具有重要的价值。

本发明授权一种八基因编辑异种器官移植供体猪的构建方法在权利要求书中公布了:1.GTKOβ4GalNT2KOCMAHKOhCD39hCD46hCD55hCD59hTBM八基因编辑猪胎儿成纤维细胞系,其特征在于:将GGTA1、β4GalNT2、CMAH基因sgRNA打靶载体或用于敲除猪基因组中GGTA1、β4GalNT2、CMAH基因的重组质粒,和hCD39hCD46hCD55hCD59hTBM人源化基因转入表达载体在转座酶的作用下共同转染至野生型猪胎儿成纤维细胞中,经筛选获得的八基因编辑阳性单克隆细胞系,即为GTKOβ4GalNT2KOCMAHKOhCD39hCD46hCD55hCD59hTBM八基因编辑猪胎儿成纤维细胞系; 所述GGTA1、β4GalNT2、CMAH基因sgRNA打靶载体是利用CRISPRCas9基因编辑技术构建的;sgRNA作用位点位于猪GGTA1基因的第3外显子、β4GalNT2基因的第2外显子、CMAH基因的第4外显子; 所述GGTA1、β4GalNT2、CMAH基因sgRNA打靶载体包括:GGTA1-sgRNA1、GGTA1-sgRNA2、β4GalNT2-sgRNA1、β4GalNT2-sgRNA2、β4GalNT2-sgRNA3、CMAH-sgRNA1、CMAH-sgRNA2; GGTA1-sgRNA1的核苷酸序列如SEQIDNO:1所示; GGTA1-sgRNA2的核苷酸序列如SEQIDNO:2所示; β4GalNT2-sgRNA1的核苷酸序列如SEQIDNO:3所示; β4GalNT2-sgRNA2的核苷酸序列如SEQIDNO:4所示; β4GalNT2-sgRNA3的核苷酸序列如SEQIDNO:5所示; CMAH-sgRNA1的核苷酸序列如SEQIDNO:6所示; CMAH-sgRNA2的核苷酸序列如SEQIDNO:7所示; 所述的GGTA1、β4GalNT2、CMAH基因sgRNA打靶载体的骨架载体为PX458-sgRNA-EGFP,其基因序号为:Addgeneno:112220; 所述用于敲除猪基因组中GGTA1、β4GalNT2、CMAH基因的重组质粒的核苷酸序列如SEQIDNO:8所示。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术,可联系本专利的申请人或专利权人云南农业大学,其通讯地址为:650201 云南省昆明市盘龙区沣源路452号云南农业大学;或者联系龙图腾网官方客服,联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

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