湖南祥民制药有限公司吴新明获国家专利权
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龙图腾网获悉湖南祥民制药有限公司申请的专利一种从辅酶Q10发酵粉中高效提纯磷脂的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN115449530B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-07-25发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202211273269.8,技术领域涉及:C12P7/66;该发明授权一种从辅酶Q10发酵粉中高效提纯磷脂的方法是由吴新明;蒋奇设计研发完成,并于2022-10-18向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种从辅酶Q10发酵粉中高效提纯磷脂的方法在说明书摘要公布了:本发明属于菌体磷脂提取领域,具体公开了一种从辅酶Q10发酵粉中高效提纯磷脂的方法,包括以下步骤:1母液培养、2种子罐培养、3发酵罐培养、4发酵液离心、5高压匀浆、6菌体破碎液离心、7真空冷冻干燥、8亚临界萃取、9丙酮萃取、10旋转蒸发;本发明通过调整培养基成分和优化培养工艺,能够实现对根癌农杆菌菌体的高密度培养,获得大量菌体,发酵液中,辅酶Q10含量可达5.1gL发酵液,磷脂含量可达13.5gL发酵液,并且本方法还公开了可以高效的从辅酶Q10发酵粉中提取出高纯度的磷脂的分离提纯方法,变废为宝,经济效益好,并且步骤简单温和,对设备要求低,绿色环保。
本发明授权一种从辅酶Q10发酵粉中高效提纯磷脂的方法在权利要求书中公布了:1.一种从辅酶Q10发酵粉中高效提纯磷脂的方法,其特征在于,包括以下步骤: 1)母液培养:将根癌农杆菌稀释至1-5x103个mL后接种0.1-1mL至斜面培养基上,将斜面培养基置于温度为30-34℃,相对湿度为45%-55%的培养箱中培养2-6d后,挑取1个菌落接种于母瓶培养基中,将母瓶培养基置于30-34℃,相对湿度为45%-55%,转速为220-350rpm的摇床中培养24-48h,得到母液菌种; 2)种子罐培养:将母液菌种按1-3‰的接种量接种至种子罐中的种子罐培养基中,在30-35℃,罐压0.03-0.05MPa,通气比0.3-0.6,搅拌转速200-250rpm,培养24-48h,得到葡萄糖残量0.5-1.0gL,菌体形状均一,无菌良好的一级种子液; 3)发酵罐培养:将种子液按5-10%的接种量接种至发酵罐中的发酵培养基,在35-38℃,罐压0.03-0.06MPa,通气比0.6-0.8,搅拌转速110-140rpm,培养24-36h; 4)发酵液离心:将发酵液8000-15000rpm低温离心10-20min,取沉淀获得菌体; 5)高压匀浆:将菌体沉淀按固液比质量1:10-20的比例加入菌体裂解液溶解后,加入高压匀浆机进行菌体破碎,收集菌体破碎液; 6)菌体破碎液离心:将菌体破碎液12000-15000rpm低温离心,弃去沉淀,取上清; 7)真空冷冻干燥:对上清进行真空冷冻干燥,真空度小于133pa,温度低于-50℃,得到干燥的发酵粉; 8)亚临界萃取:取干燥的发酵粉投入萃取罐中,将萃取罐内抽至真空状态后,加入萃取剂进行亚临界萃取,萃取结束后,将萃取所得含脂溶性成分的亚临界流体从萃取罐倒入脱溶罐中,进行加热减压蒸发,待溶剂脱除完毕,得粗提物; 9)丙酮萃取:将粗提物加入到质量分数50-60%丙酮溶液中,4-10℃冷却结晶4-8h,随后0.45μm过滤,得滤饼; 10)旋转蒸发:将滤饼用去离子水冲洗后旋转蒸发水分和有机溶剂,得到磷脂; 所述步骤1)斜面培养基的组成如下:蛋白胨8gL、酵母浸膏5gL、氯化钠3gL、琼脂18gL,pH值7.2、阿特拉津0.05gL,pH值7.4; 所述步骤2)种子罐培养基的组成如下:蔗糖35gL、玉米浆15gL、酵母浸膏10gL、NaCl3gL,阿特拉津0.03gL,pH值7.4。
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