南京大学吴兵获国家专利权
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龙图腾网获悉南京大学申请的专利一种基于秀丽隐杆线虫高通量检测污水毒性的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN115684517B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-07-25发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202211093686.4,技术领域涉及:G01N33/18;该发明授权一种基于秀丽隐杆线虫高通量检测污水毒性的方法是由吴兵;张玉;程婉清;陈玲设计研发完成,并于2022-09-08向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种基于秀丽隐杆线虫高通量检测污水毒性的方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种基于秀丽隐杆线虫高通量检测污水毒性的方法,包括以下步骤:1将污水过膜调节pH后萃取,干燥后与有机溶剂水溶液复溶,再经K缓冲液稀释,得到染毒液;2将L1期秀丽隐杆线虫加入K缓冲液,即得虫液;3染毒液暴露组:将染毒液、虫液,以及OP50浓缩液混合暴露;空白对照组:用K缓冲液替代染毒液暴露组中的染毒液;4暴露后,将线虫转移至含有琼脂垫片的孔板中,拍摄线虫的运动视频;5分析表征得到线虫的指标,计算各指标的抑制率或各组指标相对于空白对照组的值。本申请所提供的方法将暴露时间缩短为50h,提高检测通量的同时也节省了样品使用量和实验时间,操作简单,分析结果可靠。
本发明授权一种基于秀丽隐杆线虫高通量检测污水毒性的方法在权利要求书中公布了:1.一种基于秀丽隐杆线虫高通量检测污水毒性的方法,其特征在于,包括以下步骤: 1将污水过膜调节pH后萃取,干燥后与有机溶剂水溶液复溶,再经K缓冲液稀释,得到染毒液; 2将L1期秀丽隐杆线虫加入K缓冲液,即得虫液;所述虫液中线虫数量为20~30条20μL; 3染毒液暴露组:将步骤1所得染毒液、步骤2所得虫液,以及OP50浓缩液混合暴露;染毒液暴露组的染毒液的相对富集倍数是原水的15倍; 空白对照组:用K缓冲液替代染毒液暴露组中的染毒液; 所述暴露为于12~25℃下震荡40~55h; 96孔板作为暴露载体; 4暴露后,将线虫转移至含有琼脂垫片的孔板中,通过倒置荧光显微镜拍摄线虫的运动视频; 5使用Wormlab软件分析步骤4拍摄的视频,经分析表征得到线虫的指标,并通过如下公式计算各指标的抑制率I或各指标相对于空白对照组的值I’;所述线虫的指标为线虫的体长、体宽、体面积,线虫运动轨迹的波长、振幅、最大振幅,线虫活性的摆动频率、游泳速度和活力; I’=I1I0 其中,I为各指标的抑制率,I’为各指标相对于空白对照组的值,I0为空白对照组的指标值,I1为染毒液暴露组的指标值; 所述K缓冲液:2.386gKCl,2.98gNaCl,加去离子水至1L,搅匀后在121℃下灭菌20min。
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