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龙图腾网获悉中国农业科学院植物保护研究所申请的专利黄曲霉菌产毒菌株孢子浓度荧光定量PCR检测方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN116004883B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-07-25发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202210970829.9，技术领域涉及：C12Q1/6895；该发明授权黄曲霉菌产毒菌株孢子浓度荧光定量PCR检测方法是由张兰;刘新刚;付瑞强;张燕宁;毛连纲;朱丽珍;蒋红云设计研发完成，并于2022-08-13向国家知识产权局提交的专利申请。

本黄曲霉菌产毒菌株孢子浓度荧光定量PCR检测方法在说明书摘要公布了：本发明公开了黄曲霉菌产毒菌株孢子浓度荧光定量PCR检测方法。该方法中，检测黄曲霉菌产毒菌株孢子浓度的荧光定量PCR引物组，由序列表中序列1所示的核苷酸和序列表中序列2所示的核苷酸组成。本研究建立的检测方法操作简单快速，特异性强，稳定性好，灵敏度高，适合大批量检测。

本发明授权黄曲霉菌产毒菌株孢子浓度荧光定量PCR检测方法在权利要求书中公布了：1.一种检测农产品样品中黄曲霉菌产毒菌株孢子浓度的荧光定量PCR方法，包括下述步骤： 1）将待测样品用灭菌蒸馏水震荡混匀悬浮获得黄曲霉菌产毒菌株孢子悬浮液；获得的黄曲霉菌产毒菌株孢子悬浮液转移置于50mL离心管中震荡混匀3min；将离心管中混匀后的孢子悬浮液用灭菌后的脱脂棉过滤去掉其他物质，然后用5mLddH2O冲洗脱脂棉，得到纯净的孢子悬浮液，于离心机中在12000rpm离心15min后，去掉上清，加入1mLddH2O获得浓缩孢子悬浮液； 2）提取待测样品的浓缩孢子悬浮液DNA；提取待测样品DNA的方法为待测样品孢子悬浮液于1.5mL离心管内，于离心机中在12000rpm离心15min后，去掉上清;将孢子沉淀以液氮冷冻，研磨，加200μLddH2O于离心管内，置于沸水中9min,14000r，4℃，离心15min，所得上清即为黄曲霉菌孢子DNA溶液； 3）以待测样品的浓缩孢子悬浮液DNA为模板，用荧光定量PCR引物组进行荧光定量PCR检测，获得Ct值；所述荧光定量PCR引物组，由序列表中序列1所示的核苷酸和序列表中序列2所示的核苷酸组成； 4）将步骤3）获得的Ct值代入步骤1）获得的黄曲霉菌产毒菌株孢子浓度与Ct值线性曲线y=-2.7406x+48.722，其中，y为荧光定量PCRCt值，x=lgA,其中A为黄曲霉菌产毒菌株孢子浓度，单位为个ml，换算得到待测样品孢子悬浮液中黄曲霉菌产毒菌株孢子浓度； 所述荧光定量PCR的反应体系为20μL体系，包括DNA模板1μL，10μM序列表中序列1所示引物0.4μL，10μM序列表中序列2所示引物0.4μL,Mix10μL,ddH2O8.2μL； 所述荧光定量PCR的反应程序为：先95℃2min，然后95℃，10s，62.5℃30s，40个循环，最后MeltCurveStage:95℃15s，60℃1min，95℃1s。

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