中南林业科技大学;湖南省产商品质量检验研究院许东获国家专利权
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龙图腾网获悉中南林业科技大学;湖南省产商品质量检验研究院申请的专利一种食源性致病菌高灵敏快速显色检测方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN114910477B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-07-25发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202210501530.9,技术领域涉及:G01N21/84;该发明授权一种食源性致病菌高灵敏快速显色检测方法是由许东;彭晨展;王芳;孙靖波;李宏琛;欧阳敏;罗红梅;余婧;宋晟;李白玉设计研发完成,并于2022-05-10向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种食源性致病菌高灵敏快速显色检测方法在说明书摘要公布了:本发明提供一种食源性致病菌高灵敏快速显色检测方法,包括如下步骤:制备银纳米颗粒、金纳米颗粒和枝状金纳米颗粒;采用沙门氏菌抗体、金黄色葡萄球菌抗体和志贺氏菌抗体分别对银纳米颗粒、金纳米颗粒和枝状金纳米颗粒进行修饰;制备多巴胺包裹修饰的水基磁流体;样品检测,通过磁性纳米颗粒表面正电荷化,富集检测样品中的微生物;通过外加磁场实现检测样品中微生物和基质的分离;以沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和志贺氏菌为靶标,再与抗体修饰后的纳米颗粒作用后通过暗场显微成像技术检测致病菌。本发明还提供的食源性致病菌高灵敏快速显色检测方法,检测无需扩菌、检测灵敏度高,且可实现多目标检测。
本发明授权一种食源性致病菌高灵敏快速显色检测方法在权利要求书中公布了:1.一种食源性致病菌高灵敏快速显色检测方法,其特征在于,包括如下步骤: 步骤S1,制备银纳米颗粒、球形金纳米颗粒和枝状金纳米颗粒;所述银纳米颗粒在暗场显微镜下呈蓝色,所述球形金纳米颗粒溶液呈红色,其在暗场显微镜下呈绿色,所述枝状金纳米颗粒溶液呈蓝色,其在暗场显微镜下呈红色; 步骤S2,纳米颗粒修饰,采用沙门氏菌抗体、金黄色葡萄球菌抗体和志贺氏菌抗体分别对银纳米颗粒、金纳米颗粒和枝状金纳米颗粒进行修饰; 步骤S3,制备和修饰磁性纳米颗粒,得到多巴胺包裹修饰的水基磁流体,具体方法如下: 将FeCl3·6H2O和FeSO4·4H2O按质量比(1.85-2.15):1溶于去离子水中,氮气保护下于78~82℃下快速加入氨水,温度稳定后逐滴加入质量浓度为1%的多巴胺,并搅拌80~100min,制得多巴胺包裹修饰的水基磁流体;所述多巴胺包裹修饰的水基磁流体,通过分子共价键偶联,将含有伯胺、仲胺和叔胺的小分子连接到磁性纳米颗粒表面; 步骤S4,样品检测,通过磁性纳米颗粒表面正电荷化,富集检测样品中的微生物,具体操作如下:取样品适量溶于生理盐水中,调节pH至中性,加入步骤S3的多巴胺包裹修饰的水基磁流体,混合均匀后静置一段时间; 通过外加磁场实现检测样品中微生物和基质的分离;以沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和志贺氏菌为靶标,再与抗体修饰后的纳米颗粒作用后通过暗场显微成像技术检测致病菌,且在显微镜下沙门氏菌呈现蓝色亮斑,金黄色葡萄球菌呈现绿色亮斑,志贺氏菌呈现红色亮斑。
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