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武汉原谷生物科技有限责任公司熊雨胜获国家专利权

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龙图腾网获悉武汉原谷生物科技有限责任公司申请的专利一种来源于美洲羊驼中天然抗体的纯化方法及其应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN114292328B

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-07-25发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202111655273.6,技术领域涉及:C07K16/18;该发明授权一种来源于美洲羊驼中天然抗体的纯化方法及其应用是由熊雨胜;张薇;杜厚明设计研发完成,并于2021-12-30向国家知识产权局提交的专利申请。

一种来源于美洲羊驼中天然抗体的纯化方法及其应用在说明书摘要公布了:本发明公开了一种来源于美洲羊驼中天然抗体的纯化方法及其应用。所述天然抗体的纯化方法,包括如下步骤:S1、美洲羊驼血清的预处理,S2、蛋白A柱纯化,S3、离子交换层析,S4、羟基磷灰石层析;本发明通过特定的纯化步骤首先进行美洲羊驼血清的预处理,之后进行蛋白A柱纯化,然后进行离子交换层析,最后进行羟基磷灰石层析,并且上述纯化步骤之间具有协同作用,最后得到纯度和收率极高的天然抗体IgG1、天然重链抗体IgG2和天然重链抗体IgG3,所述天然抗体在制备抗天然抗体的抗体技术领域中具有良好的应用前景。

本发明授权一种来源于美洲羊驼中天然抗体的纯化方法及其应用在权利要求书中公布了:1.一种来源于美洲羊驼中天然抗体的纯化方法,其特征在于,包括如下步骤: S1、美洲羊驼血清的预处理:采用正辛酸-饱和硫酸铵沉淀法,将美洲羊驼血清中的天然抗体提取出来,得到预处理液; S2、蛋白A柱纯化:使用蛋白A柱对步骤S1中得到的预处理液进行纯化,得到天然重链抗体IgG2和初级处理液; S3、离子交换层析:使用阴离子交换层析柱,对步骤S2中得到的初级处理液进行纯化,得到天然抗体IgG1和中级处理液; S4、羟基磷灰石层析:使用羟基磷灰石层析柱,对步骤S3中得到的中级处理液进行纯化,得到天然重链抗体IgG3和少量的天然重链抗体IgG2; 步骤S1中,正辛酸-饱和硫酸铵沉淀法的具体操作步骤如下:将美洲羊驼血清与pH为4~6的醋酸盐缓冲液按1:(2~3)的体积比混合,加入3~5%正辛酸,室温混合,之后在2~8℃静置过夜,使其充分沉淀;离心取上清,并加入等体积饱和硫酸铵溶液,充分混合后,在2~8℃静置过夜,离心取沉淀,并加入3~5倍所述沉淀重量的饱和硫酸铵溶液提取3~5次,最后一次的沉淀用PBS缓冲液溶解,经透析后,即可得到预处理液; 步骤S2具体包括如下步骤: S21、上样:先用10~12倍柱体积的PBS缓冲液平衡蛋白A柱,之后,将步骤S1中得到的预处理液上样至蛋白A柱中,用5~8倍柱体积的10mMpH为7.0~7.2的PBS缓冲液冲洗,流速为1~2mLmin,得到初级处理液; S22、洗脱:用3~5倍柱体积的20mMpH为4.0~5.0的柠檬酸缓冲液继续冲洗步骤S21中的蛋白A柱,流速为0.5~1mLmin,收集洗脱液,并加入1MpH为8.5的Tris-HCl缓冲液,调节溶液pH为7.2~7.4,即为天然重链抗体IgG2; 步骤S3中所述阴离子交换层析柱的填料选自DEAE-Sepharose、Capto-DEAE、QSepharose、Capto-Q、QAESephadex中的一种。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术,可联系本专利的申请人或专利权人武汉原谷生物科技有限责任公司,其通讯地址为:430000 湖北省武汉市东湖新技术开发区神墩四路666号F区1层南(自贸区武汉片区);或者联系龙图腾网官方客服,联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

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