江苏农牧科技职业学院张勇获国家专利权
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龙图腾网获悉江苏农牧科技职业学院申请的专利一种蓝羊茅高效诱导愈伤组织及再生方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN118355853B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-08-01发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202311710075.4,技术领域涉及:A01H4/00;该发明授权一种蓝羊茅高效诱导愈伤组织及再生方法是由张勇;翁金洋;徐璐;穆淑红;徐媛媛;李成忠设计研发完成,并于2023-12-12向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种蓝羊茅高效诱导愈伤组织及再生方法在说明书摘要公布了:本发明涉及植物组织培养技术领域,具体公开了一种蓝羊茅高效诱导愈伤组织及再生方法。本发明以蓝羊茅种子“非斯蒂娜”为外植体,消毒灭菌后进行愈伤组织的诱导,通过诱导愈伤成熟,筛选出胚性愈伤组织为受体,依次进行种子消毒及预处理、愈伤组织诱导、继代培养、分化培养及幼苗移栽,成功得到了淡黄色硬质颗粒状、分化率高的胚性愈伤组织。具有操作简单,取材方便,繁殖系数明显比室外高,种苗生长速度快等优点。本发明首次以种子为外植体获得了蓝羊茅愈伤组织以及再生苗,在蓝羊茅中建立起完善高效的再生体系,为通过转基因技术获得具有优良抗逆性状的蓝羊茅新品种、关键基因的功能验证奠定了基础。
本发明授权一种蓝羊茅高效诱导愈伤组织及再生方法在权利要求书中公布了:1.一种蓝羊茅愈伤组织诱导和分化再生的方法,其特征在于,包括如下步骤: S1:种子预处理:去除种子颖壳,消毒处理吸干水分后获得无菌种子; S2:愈伤组织诱导:将S1获得的无菌种子接种愈伤组织诱导培养基,诱导愈伤组织,其中,愈伤组织诱导培养基为MS培养基+8mgL2,4-D+0.5mgLNAA+30.0gL蔗糖+8.0gL琼脂; S3:愈伤组织继代:将S2培养所得愈伤组织转入继代培养基进行继代培养,其中,继代培养基为MS培养基+4-12mgL2,4-D+0.5mgLNAA+30.0gL蔗糖+20gL甘露醇+8.0gL琼脂; S4:愈伤组织分化:将愈伤组织转至高渗培养基于25℃黑暗预培养15d,高渗培养基为MS培养基+4.0mgL2,4-D+60.0gL蔗糖+8.0gL琼脂,选取组织呈结构致密、颗粒状、淡黄色的胚性愈伤组织,转入分化培养基进行分化培养,分化培养基为MS培养基+1-3.0mgL6-BA+0.1mgLNAA+30.0gL蔗糖+8.0gL琼脂; S5:生根和移栽:待S4培养的幼苗苗高达4-5cm时,切下转移到生根培养基,待长出大量不定根时移栽;生根培养基为12MS培养基+0.5-1.0mgLNAA+30.0gL蔗糖+8.0gL琼脂; 所述S1中:将种子放置50%硫酸溶液中振荡浸泡25分钟,用蒸馏水洗涤后去除颖壳;消毒处理为:在50mL的次氯酸钠溶液中浸泡10min,用无菌水清洗后置于无菌滤纸吸干水分,用消毒后的无菌手术刀沿凹槽将种子纵切后备用。
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