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龙图腾网获悉华南理工大学申请的专利一种基于氧化石墨烯和荧光碳点功能化DNA的生物传感器的制备方法与应用获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN115980008B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-08-01发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202210985650.0，技术领域涉及：G01N21/64；该发明授权一种基于氧化石墨烯和荧光碳点功能化DNA的生物传感器的制备方法与应用是由魏坤;高媛媛;鲍倩泽设计研发完成，并于2022-08-16向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种基于氧化石墨烯和荧光碳点功能化DNA的生物传感器的制备方法与应用在说明书摘要公布了：本发明公开一种基于氧化石墨烯和荧光碳点功能化DNA的生物传感器的制备方法与应用。该方法为：超声分散制备氧化石墨烯的均一溶液；然后制备双链DNA‑金纳米颗粒荧光探针；水热法制备荧光碳点，并将表面修饰羧基的CDs和末端修饰氨基的FuelDNA偶联在一起形成FuelDNA‑CDs复合物；将末端标记碳点荧光基团的FuelDNA溶液添加到GO溶液中进行荧光淬灭反应；荧光淬灭完全后，加入dsDNA‑AuNPs和miRNAlet‑7a，进行两次链式置换反应，检测荧光恢复值。该方法操作简便，为miRNAlet‑7a的检测提供了一种新思路，该方法在早期癌症诊断和临床分析中具有巨大的应用潜力。

本发明授权一种基于氧化石墨烯和荧光碳点功能化DNA的生物传感器的制备方法与应用在权利要求书中公布了：1.一种基于氧化石墨烯和荧光碳点功能化DNA的生物传感器的制备方法，其特征在于，包括以下步骤： （1）超声分散制备氧化石墨烯的均一溶液； （2）利用RecognitionDNA，HairpinDNA，AuNPs制备dsDNA-AuNPs荧光探针； （3）水热法制备荧光碳点CDs，并将表面修饰羧基的碳点和末端修饰氨基的FuelDNA脱水缩合偶联在一起形成FuelDNA-CDs复合物； （4）将FuelDNA-CDs复合物溶液添加到氧化石墨烯溶液中进行荧光淬灭反应； （5）荧光淬灭完全后，加入dsDNA-AuNPs和miRNAlet-7a，进行两次链式置换反应，检测荧光恢复值； 步骤（1）的具体步骤为：将5-30mg的氧化石墨烯片添加到5-30mL的去离子水中，随后将该溶液放在冰浴中通过超声处理1-4h；最终收集到均匀的氧化石墨烯棕黄色溶液，并将其在室温下保存以备进一步使用； 步骤（2）中，dsDNA-AuNPs荧光探针的制备，方法如下：以（1-5）：（100-500）的摩尔比将巯基化的寡核苷酸RecognitionDNA用TCEP还原0.5-3h，以防止二硫键的形成；之后将RecognitionDNA和HairpinDNA以（1-3）：（1.2-3.6）的摩尔比混合在磷酸盐缓冲液中；将混合物加热至60-80℃保持5-20min，并使其缓慢冷却至室温以杂交得到dsDNA；向混合物中添加10-30nMAuNPs溶液；然后将混合物溶液在室温下进行过夜处理，将溶液以10000-14000rpmmin的转速离心处理10-30min，撇去上清液以去除未结合上AuNPs的DNA，最后，将所得溶液洗涤两次，并在避光条件下0-10℃储存在PBS溶液中，即得； 步骤（3）具体步骤为： 将1-5g柠檬酸和1-2.5mL乙二胺溶解于10-50mL蒸馏水中；然后将溶液转移到聚四氟乙烯高压釜中，在100-150℃下加热2.5-5h；制得的溶液经二次蒸馏水透析，保留分子量为3500-5500Da；然后，将25-50mg制备好的CDs分散在25-50mL含有1-5gNaOH和1-5gClCH2COONa的水溶液中，然后进行超声处理2-3h；经过这些处理后，生成的CD-COONa用HCl中和并再次透析，得到表面含羧基基团的CDs；将制备好的CDs溶于10-100mMPBS，pH=7.0-7.5中获得1-2mg·mL-1的CDs溶液；然后1-3mL，1-2mg·mL-1的CDs溶液中加入50-100mMNHS，1-5mL和500mMEDC，1-5mL，超声处理1-3h；之后加入FuelDNA，并进一步在0-10℃下孵育12-36h，过量的没有连接在FuelDNA末端的CDs用透析袋中除去，保留的分子量：8000-10000Da； 所述RecognitionDNA的碱基序列为:5’-SH-AAAAAAAAAAACTATACAACCTACTACCTC ATAGGTAC-3’； 所述HairpinDNA的碱基序列为:5’-ACAACCTATGAGGTAGTAGGTTGT-3’； 所示FuelDNA的碱基序列为:5’-NH2-G*T*A*CCTATGAGGTAGTAGGT*T*G*-3’； 所述miRNAlet-7a的碱基序列为:5’-UGAGGUAGUAGGUUGUAUAGUU-3’。

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