中国测试技术研究院周李华获国家专利权
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龙图腾网获悉中国测试技术研究院申请的专利食品中吡咯里西啶类生物碱的检测方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN120195323B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-08-05发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202510687480.1,技术领域涉及:G01N30/02;该发明授权食品中吡咯里西啶类生物碱的检测方法是由周李华;冯德建;孙羽婕;王芳;尹虹又;陈泽羽;李椤颢;樊东生;胡雅琴;李佳雯;吴微设计研发完成,并于2025-05-27向国家知识产权局提交的专利申请。
本食品中吡咯里西啶类生物碱的检测方法在说明书摘要公布了:本发明涉及一种食品中吡咯里西啶类生物碱的检测方法,属于检测技术领域。本发明要解决的技术问题是提供一种新的食品中吡咯里西啶类生物碱的检测方法。该检测方法包括以下步骤:A.食品处理,包括固体食品的处理或液体食品的处理,固体食品的处理为粉碎、含0.1%甲酸的95%乙醇溶液两次提取、离心、活化后的PXC‑SPE小柱净化得到上清液4;液体食品的处理为H2SO4溶液提取、离心、活化后的PXC‑SPE小柱净化得到上清液4;B.用液相色谱‑串联质谱测定上清液4中的吡咯里西啶类生物碱。本发明有效解决指标覆盖少、基质干扰复杂等瓶颈难题,建立多种食品中吡咯里西啶类生物碱污染的液相色谱‑串联质谱精准检测方法,检测的吡咯里西啶类生物碱种类更全面。
本发明授权食品中吡咯里西啶类生物碱的检测方法在权利要求书中公布了:1.食品中吡咯里西啶类生物碱的检测方法,其特征在于,包括以下步骤: A.食品处理:包括固体食品的处理或液体食品的处理: 固体食品的处理为: a.将固体食品粉碎后过60目筛得到筛下物和筛上物; b.取a步骤的筛下物与含0.1%甲酸的95%乙醇溶液混合,涡旋1min,40Hz超声提取30min,在8500rpm条件下离心5min得到上清液1和残渣1,所述筛下物与含0.1%甲酸的95%乙醇溶液的质量体积比为1g:10mL; c.再将残渣1与含0.1%甲酸的95%乙醇溶液混合,涡旋1min,40Hz超声提取30min,在8500rpm条件下离心5min得到上清液2和残渣2; d.将上清液1和上清液2合并,用氮气吹至5mL以下,再用浓度0.1%的甲酸水溶液定容至10mL,离心得到上清液3; e.再取3~5mL上清液3上样到活化后的PXC-SPE小柱中,上样完成后,先采用3mL水淋洗,再用3mL甲醇淋洗,淋洗后将PXC-SPE小柱内的淋洗液吹打干,再用5mL浓度5%的氨水甲醇溶液洗脱,收集到洗脱液,并将洗脱液在40℃下氮气吹干,用复溶剂定容至1mL,经0.22μm尼龙滤膜过滤得到上清液4;所述PXC-SPE小柱的活化方法为用3mL甲醇、3mL水、3mL浓度0.1%的甲酸水溶液依次过PXC-SPE小柱;所述复溶剂为含0.1%甲酸的50%甲醇溶液; 液体食品的处理为: 液体食品与H2SO4溶液混匀,40Hz超声提取30min,冷却至室温,然后8500rpm离心5min得上清液3,将上清液3按照e步骤进行后续操作得到上清液4;所述液体食品与0.05molLH2SO4溶液的质量体积比为1g:10mL;所述H2SO4溶液的浓度为0.05molL; B.用液相色谱-串联质谱测定上清液4中的吡咯里西啶类生物碱; 其中,所述含0.1%甲酸的95%乙醇溶液、浓度5%的氨水甲醇溶液、含0.1%甲酸的50%甲醇溶液、浓度0.1%的甲酸水溶液中的百分含量均为体积百分含量; 所述液相色谱的色谱柱为:AgilentEclipsePlusC18RRHD色谱柱;液相色谱的流动相包括A、B、C三种溶液;A为含5mmolL甲酸铵的0.1%体积浓度甲酸水溶液,B为甲醇,C为乙腈;采用流动相依次梯度洗脱,所述梯度洗脱程序为:0~2min,A相体积95%至90%,B相体积5%至10%;2~5min,A相体积90%至80%,B相体积10%至20%;5~10min,A相体积80%,B相体积20%;10~16min,A相体积80%至60%,B相体积20%至40%;16~18min,A相体积60%至50%,B相体积40%至50%;18~22min,A相体积50%,B相体积50%;22~25min,A相体积50%至5%,B相体积50%至0%,C相体积0%至95%;25~28min,A相体积5%,B相体积0%,C相体积95%;28~28.1min,A相体积5%至95%,B相体积0%至5%,C相体积95%至0%;28.1~35min,A相体积95%,B相体积5%;流量:0.3mLmin;色谱柱温度:40℃;进样量:2μL; 所述串联质谱的质谱条件包括: 离子源:电喷雾离子源;扫描模式:正离子模式;监测方式:多反应监测;干燥气N2温度:350℃;雾化气N2压力:275.8kPa;干燥气流量:12.0Lmin;鞘气N2温度:350℃;鞘气流量:12.0Lmin;毛细管电压:负离子模式3500V,正离子模式3500V。
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