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龙图腾网获悉山东奥克斯畜牧种业有限公司申请的专利一种牛体外胚胎一步法中冷冻液的添加剂及牛体外胚胎一步法冷冻方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN117502427B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-08-08发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202311346452.0，技术领域涉及：A01N1/126；该发明授权一种牛体外胚胎一步法中冷冻液的添加剂及牛体外胚胎一步法冷冻方法是由张燕;马庆涛;王玲玲;高运东设计研发完成，并于2023-10-17向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种牛体外胚胎一步法中冷冻液的添加剂及牛体外胚胎一步法冷冻方法在说明书摘要公布了：本发明公开了一种牛体外胚胎一步法中冷冻液的添加剂及牛体外胚胎一步法冷冻方法，属于动物胚胎冷冻保存及胚胎移植技术领域。本发明所述的添加剂为包含氯化钠、氯化钾、氯化镁、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、葡萄糖、丙酮酸钠、氯化钙、牛血清白蛋白、蔗糖、乙二醇和透明质酸的水溶液；蔗糖的浓度为4.5～5.0M。本发明在牛体外胚胎一步法冷冻的基础上，通过提高常规一步法冷冻液中蔗糖浓度并额外添加透明质酸，增加了冷冻液的渗透压，有利于胚胎内部水分的排出，减少了冷冻过程中的胚胎内部冰晶形成，降低了冷冻过程对胚胎的损伤，提高牛体外胚胎冷冻解冻后的存活率、孵化率及解冻后胚胎的移植妊娠率。

本发明授权一种牛体外胚胎一步法中冷冻液的添加剂及牛体外胚胎一步法冷冻方法在权利要求书中公布了：1.一种牛体外胚胎一步法冷冻方法，其特征在于，包括如下步骤： 1配制添加剂； 2将所述添加剂与胚胎冷冻液混匀，得到含有添加剂的冷冻液； 3将所述含有添加剂的冷冻液与胚胎保存液混匀，得到平衡液滴； 4将待冷冻胚胎移入平衡液滴，静置后，将待冷冻胚胎从平衡液滴移入含有添加剂的冷冻液中； 5将待冷冻胚胎装入麦管，控制温度进行冷冻； 所述添加剂中各组分浓度为：8gL氯化钠、0.2gL氯化钾、0.1gL氯化镁、2.9gL磷酸氢二钠、0.2gL磷酸二氢钾、1gL葡萄糖、0.036gL丙酮酸钠、0.1gL氯化钙、4gL牛血清白蛋白、4.6M蔗糖、1.5M乙二醇、5mgmL透明质酸； 所述胚胎冷冻液为自制胚胎冷冻液或商业化胚胎冷冻液； 所述自制胚胎冷冻液为包含8gL氯化钠、0.2gL氯化钾、0.1gL氯化镁、2.9gL磷酸氢二钠、0.2gL磷酸二氢钾、1gL葡萄糖、0.036gL丙酮酸钠、0.1gL氯化钙、4gL牛血清白蛋白、0.1M蔗糖、1.5M乙二醇的水溶液； 按照8：2的体积比将胚胎冷冻液与一步法冷冻液添加剂混合均匀后形成含有添加剂的冷冻液； 按照1：1的体积比将胚胎保存液和含有添加剂的冷冻液混合均匀后形成平衡液滴；平衡液滴渗透压处于胚胎保存液与含有添加剂的冷冻液之间，处理胚胎时，胚胎所处环境处于渗透压稳步升高； 所述将待冷冻胚胎装入麦管为：按照胚胎保存液、气泡、胚胎保存液、气泡、含有胚胎的含有添加剂的冷冻液、气泡、胚胎保存液、气泡、胚胎保存液的顺序进行五段式装管，其中每段液柱的长度相同，将胚胎装入麦管中。

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