北京理工大学;北京理工大学唐山研究院霍毅欣获国家专利权
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龙图腾网获悉北京理工大学;北京理工大学唐山研究院申请的专利一种筛选sgRNA骨架活性突变体的系统及方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN118853714B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-08-15发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202410150482.2,技术领域涉及:C12N15/63;该发明授权一种筛选sgRNA骨架活性突变体的系统及方法是由霍毅欣;孙丽超;梁泽宇;郭淑元设计研发完成,并于2024-02-02向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种筛选sgRNA骨架活性突变体的系统及方法在说明书摘要公布了:本发明提供了一种快速筛选sgRNA骨架sgRNAscaffold活性突变体序列的系统和方法,属于生物工程技术领域。所述体系包含Cas蛋白表达载体和sgRNA骨架突变体筛选载体;所述Cas蛋白表达载体上包含以下表达元件:Cas蛋白编码基因、质粒复制子、以及第一抗性筛选标签表达盒;所述sgRNA骨架突变体筛选载体包含以下表达元件:复制子、第二抗性筛选标签表达盒、第三抗性筛选标签表达盒、用于表达sgRNA骨架序列的启动子和终止子。所述系统和方法可以应用于CRISPR基因编辑系统sgRNA骨架元件的筛选,利用本方法,能够得到序列多样的sgRNA骨架,进而应用于多靶点基因编辑、菌株库的构建等领域,拓展CRISPR基因编辑系统的应用领域和编辑效率。
本发明授权一种筛选sgRNA骨架活性突变体的系统及方法在权利要求书中公布了:1.一种sgRNA骨架活性突变体筛选系统,其特征在于,所述系统包含Cas蛋白表达载体和sgRNA骨架突变体筛选载体; 所述Cas蛋白表达载体上包含以下表达元件:Cas蛋白编码基因、质粒复制子、以及第一抗性筛选标签表达盒;所述sgRNA骨架突变体筛选载体包含以下表达元件:质粒复制子、第二抗性筛选标签表达盒、第三抗性筛选标签表达盒、用于表达sgRNA骨架序列的启动子和终止子; 所述Cas蛋白为野生型Cas9或其变体; 所述第三抗性筛选标签表达盒上包含第三抗性筛选标签,第三抗性筛选标签中加入一段插入序列使其失活,所述插入序列由可被识别的23bp外源序列和与第三抗性筛选标签插入位点上游同源的序列组成,所述23bp外源序列包含20bp识别序列和3bpPAM,所述识别序列是任意被CRISPRCas9高效识别的外源序列。
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