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甘肃省畜牧兽医研究所蒙琦获国家专利权

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龙图腾网获悉甘肃省畜牧兽医研究所申请的专利一种可视化检测牛病毒性腹泻病毒的CRISPR-Cas12a系统以及检测方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119932231B

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-08-22发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202510354786.5,技术领域涉及:C12Q1/70;该发明授权一种可视化检测牛病毒性腹泻病毒的CRISPR-Cas12a系统以及检测方法是由蒙琦;常亮;丁姝元;杨明;刘盛楠;贺泂杰设计研发完成,并于2025-03-25向国家知识产权局提交的专利申请。

一种可视化检测牛病毒性腹泻病毒的CRISPR-Cas12a系统以及检测方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种可视化检测牛病毒性腹泻病毒的CRISPR‑Cas12a系统以及检测方法,属于病毒检测技术领域。本发明通过整合逆转录交叉引物扩增RT‑CPA和CRISPRCas12a的靶向切割能力,将RT‑CPA预扩增结合Cas12a信号放大,成功构建了一种牛病毒性腹泻病毒检测平台,显著提升了BVDV检测的灵敏度和特异性。与传统RT‑PCR相比,RT‑CPA技术通过等温扩增显著简化了反应条件,避免了热循环仪依赖,同时通过交叉引物设计提升了扩增效率,使检测下限达到8.0copiesμL。

本发明授权一种可视化检测牛病毒性腹泻病毒的CRISPR-Cas12a系统以及检测方法在权利要求书中公布了:1.一种非疾病检测或治疗目的的牛病毒性腹泻病毒的检测方法,其特征在于,包括以下步骤: (1)利用CPA引物对待测样本进行扩增,得到扩增产物; (2)利用CRISPR-Cas12a系统对扩增产物进行检测,判断是否含有牛病毒性腹泻病毒; 所述CPA引物包括剥离引物4s、剥离引物5a、交叉引物2a1s、检测引物2a和检测引物3a; 所述剥离引物4s的核苷酸序列如SEQIDNO.13所示; 所述剥离引物5a的核苷酸序列如SEQIDNO.12所示; 所述交叉引物2a1s的核苷酸序列如SEQIDNO.16所示; 所述检测引物2a的核苷酸序列如SEQIDNO.14所示; 所述检测引物3a的核苷酸序列如SEQIDNO.15所示; 所述扩增产物为待测样本的RT-CPA反应产物; 所述CRISPR-Cas12a系统包括CleavageBuffer3μL、LbCas12a1μL、crRNA1μL、ssDNA1.2μL、扩增产物1μL和ddH2O22.8μL; 所述crRNA的核苷酸序列如SEQIDNO.26所示,浓度为125nmolL;所述LbCas12a的浓度为75nmolL;所述ssDNA的核苷酸序列如SEQIDNO.28所示,在5’端连接一个荧光基团FAM、3’端连接一个淬灭集团BHQⅠ。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术,可联系本专利的申请人或专利权人甘肃省畜牧兽医研究所,其通讯地址为:744000 甘肃省平凉市崆峒大道中路150号;或者联系龙图腾网官方客服,联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

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