浙江工业大学吴杰群获国家专利权
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龙图腾网获悉浙江工业大学申请的专利基于RNA干扰动态调控酿酒酵母中质粒拷贝数的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN120099065B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-08-29发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202510591662.9,技术领域涉及:C12N15/81;该发明授权基于RNA干扰动态调控酿酒酵母中质粒拷贝数的方法是由吴杰群;王曼曼;蔡倩茹;朱进妹设计研发完成,并于2025-05-09向国家知识产权局提交的专利申请。
本基于RNA干扰动态调控酿酒酵母中质粒拷贝数的方法在说明书摘要公布了:本发明提供了一种基于RNA干扰动态调控酿酒酵母中质粒拷贝数的方法。该方法通过重建一个正交RNAi系统,将酿酒酵母作为一个具有动态可编程质粒拷贝数的合成生物学底盘,并通过整合来自卡斯特利酿酒酵母的异源RNAi机制,设计靶向质粒编码选择标记的序列特异性siRNA,建立了一个化学诱导的基因剂量控制平台,实现质粒拷贝数的动态调控,从而优化基因表达剂量,提高生物合成效率。将RNAi介导的拷贝数调节应用于类胡萝卜素生物合成途径,与静态质粒系统相比,番茄红素滴度增加了18.6倍。该方法进一步丰富了合成代谢调控的工具集,在提升微生物细胞工厂生产性能方面的巨大潜力,为合成生物学领域内的代谢工程优化提供了新思路。
本发明授权基于RNA干扰动态调控酿酒酵母中质粒拷贝数的方法在权利要求书中公布了:1.一种动态调控酿酒酵母中质粒拷贝数的方法,其特征在于,包括:在酿酒酵母细胞中重建RNA干扰通路,并利用化学诱导的发夹RNA表达模块靶向质粒编码的选择标记基因,实现质粒拷贝数的动态调控;所述发夹RNA表达模块包括β-雌二醇诱导系统、与选择标记基因同源的发夹结构序列; 所述在酿酒酵母细胞中重建RNA干扰通路的方法包括:将来源于卡斯特利酿酒酵母的DCR1基因、AGO1基因分别整合到酿酒酵母基因组的中性位点;所述酿酒酵母基因组的中性位点包括:416d位点、308a位点; 所述化学诱导的方法包括:通过引入至酿酒酵母基因组上的β-雌二醇诱导系统对发夹RNA表达模块进行调控; 所述β-雌二醇诱导系统包括:与β-雌二醇结合的DNA结合域ZF97-4、雌激素配体结合域、转录激活域VP16、含有97-4操作子的工程化启动子; 所述质粒为含有2μ复制子的高拷贝质粒; 所述选择标记基因包括:抗生素抗性基因、营养缺陷型标记基因。
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