中国医学科学院肿瘤医院;北京橡鑫生物科技有限公司邢念增获国家专利权
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龙图腾网获悉中国医学科学院肿瘤医院;北京橡鑫生物科技有限公司申请的专利一种MIP探针及其在尿液游离DNA捕获建库中的应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN118995902B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-08-29发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202411333309.2,技术领域涉及:C12Q1/6876;该发明授权一种MIP探针及其在尿液游离DNA捕获建库中的应用是由邢念增;韩苏军;王明帅;杨飞亚;刘磊;王旺;孙宏设计研发完成,并于2024-09-24向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种MIP探针及其在尿液游离DNA捕获建库中的应用在说明书摘要公布了:本申请属于生物测序技术领域,公开了一种MIP探针及其在尿液游离DNA捕获建库中的应用。所述MIP探针从5’‑3’依次包括,5’捕获臂、含有10nt次黄嘌呤的F端接头、R端接头、3’捕获臂。本方法通过捕获臂碱基互补配对、延伸、连接制备DNA文库,兼容不同长度DNA片段和单链DNA,提升模板利用率,进而利于尿液游离DNA低频突变检出。本方法通过控制探针两侧捕获臂之间待测染色体DNA的跨越长度,固定了文库插入片段长度,使DNBSEQ平台测序荧光信号更均一,数据产量和质量更高。本方法将捕获、建库和上机文库制备三步骤合并,免去了常规方法中中间文库质控和捕获前抽干浓缩等操作,操作时间更短;本方法捕获、建库过程中无PCR扩增,减少了由于PCR扩增带来的错误积累,降低背景噪音,提高低频突变检测灵敏度和特异度。
本发明授权一种MIP探针及其在尿液游离DNA捕获建库中的应用在权利要求书中公布了:1.一种基于DNBSEQ测序平台的尿液游离DNA的捕获建库方法,其特征在于,所述捕获建库方法包括以下步骤, (1)将MIP探针与尿液待测序样本DNA进行混合,并变性杂交;其中,所述MIP探针从5’-3’依次包括,5’捕获臂、F端接头、R端接头、3’捕获臂,所述F端接头从5’-3’依次包括DNBSEQ测序平台F端接头测序引物结合区、10nt次黄嘌呤、及DNBSEQ测序平台F接头末端序列,所述R端接头从5’-3’包括DNBSEQ测序平台R接头末端序列,所述5’捕获臂或3’捕获臂的序列长度为20-30nt; 所述DNBSEQ测序平台F端接头测序引物结合区的序列如SEQIDNO.1所示,所述DNBSEQ测序平台F接头末端序列如SEQIDNO.2所示,所述DNBSEQ测序平台R接头末端序列如SEQIDNO.3所示; (2)所述MIP探针3’捕获臂延伸、连接,并经过外切酶消化,获得捕获产物; (3)将所述捕获产物变性,并通过Indexoligo延伸及连接,获得环化的Index文库;其中,所述Indexoligo的序列如SEQIDNO.4所示; (4)DNB制备,建库完成。
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