合肥工业大学智能制造技术研究院;重庆市食品药品检验检测研究院沈益忠获国家专利权
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龙图腾网获悉合肥工业大学智能制造技术研究院;重庆市食品药品检验检测研究院申请的专利一种基于类漆酶活性纳米酶双模态检测酒类中氨基甲酸乙酯的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119198603B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-08-29发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202411226763.8,技术领域涉及:G01N21/33;该发明授权一种基于类漆酶活性纳米酶双模态检测酒类中氨基甲酸乙酯的方法是由沈益忠;汪恒;吴国建;李莎设计研发完成,并于2024-09-03向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种基于类漆酶活性纳米酶双模态检测酒类中氨基甲酸乙酯的方法在说明书摘要公布了:一种基于类漆酶活性纳米酶双模态检测酒类中氨基甲酸乙酯的方法,包括如下步骤:步骤1:测定不同浓度梯度的氨基甲酸乙酯标准品的待测液在420nm处吸光度值A;步骤2:测定不同浓度梯度的氨基甲酸乙酯标准品的待测液在330nm波长激发下的420nm和550nm处荧光强度信号比值F420nmF550nm;步骤3:构建标准品的线性回归方程;步骤4:取待测样品,重复步骤1、2获得待测样品的吸光度值以及待测样品的荧光强度信号比值F420nmF550nm,分别代入相应的线性方程,获得待测样品中的氨基甲酸乙酯的浓度。本发明的双模态检测结合了比色法和荧光法的优势,提升了检测的全面性和准确性。比色法提供直观的视觉信息,但灵敏度有限;而荧光法则具备更高的灵敏度和选择性。通过将两者结合,双模态检测能够在实际样本中更可靠地识别和量化目标物质,相比于单一检测具有更高的准确性。
本发明授权一种基于类漆酶活性纳米酶双模态检测酒类中氨基甲酸乙酯的方法在权利要求书中公布了:1.一种基于类漆酶活性纳米酶双模态检测酒类中氨基甲酸乙酯的方法,其特征在于:包括如下步骤: 步骤1:测定不同浓度梯度的氨基甲酸乙酯标准品的待测液在420nm处吸光度值A: 在常温条件下,把Cu-BH@MIP纳米酶、邻苯二胺和不同浓度梯度的氨基甲酸乙酯标准品加入HEPES缓冲液,搅拌均匀得到混合溶液,之后转移至比色皿;接着用紫外分光光度计测量420nm处的吸光度值,将其记为A; 步骤2:测定不同浓度梯度的氨基甲酸乙酯标准品的待测液在330nm波长激发下的420nm和550nm处荧光强度信号比值F420nmF550nm; 在常温条件下,把Cu-BH@MIP纳米酶、邻苯二胺和不同浓度梯度的氨基甲酸乙酯标准品加入HEPES缓冲液,搅拌均匀得到混合溶液,之后转移至比色皿;接着在330nm激发波长下用荧光光谱仪测量420nm和550nm处荧光强度信号值,获得荧光强度信号比值F420nmF550nm; 步骤3:构建标准品的线性回归方程 利用不同浓度梯度的氨基甲酸乙酯标准品所测得吸光度值A值和标准品的浓度构建紫外线性回归方程A=XCEC+y,其中CEC为标准品浓度; 利用不同浓度梯度的氨基甲酸乙酯标准品所测得荧光强度信号比值F420nmF550nm和标准品的浓度构建比率荧光信号线性回归方程F420nmF550nm=XCEC+y,其中CEC为标准品浓度; 步骤4:取待测样品,重复步骤1、2获得待测样品的吸光度值以及待测样品的荧光强度信号比值F420nmF550nm,分别代入相应的线性方程,获得待测样品中的氨基甲酸乙酯的浓度; 步骤1和步骤2中,HEPES缓冲液的pH值为8.8-9.2;邻苯二胺的浓度为10.0mmolL;Cu-BH@MIP纳米酶的浓度为100μgmL;混合溶液的总量为200.0μL;搅拌时的反应温度为50.0℃;反应时间为27.0min; 步骤3中,紫外线性回归方程为A=-0.00201CEC+1.6875;比率荧光信号线性回归方程为F420nmF550nm=0.0306CEC+0.52762; 所述Cu-BH@MIP纳米酶的制备方法包括下列步骤: S1:将CuCl2·2H2O和2-氨基对苯二甲酸溶解在DMF溶液中获得溶液A,将组氨酸溶解在乙醇与DMF溶液的混合物中,获得溶液B;然后在不断搅拌的条件下,将溶液A加入溶液B中;然后将混合物转移到密封的Teflon-高压釜中,在100-140℃下加热5-12小时;高压釜自然冷却后获得的产品离心,沉淀物用酒精和水洗涤,烘干保存,得到Cu-BH纳米酶; S2:将Cu-BH纳米酶、氨基甲酸乙酯和乙醇加入一容器中,超声至溶解;羧乙基硅三醇钠盐和原硅酸四乙酯置于所述容器中,在黑暗条件下连续搅25-35min后,加入氨水,在20-30℃下连续搅拌过夜;沉淀物用乙醇洗涤,离心弃上清;沉淀物中原始EC模板采用甲醇索氏萃取法提取,得到Cu-BH@MIP沉淀;该聚合物在55-65℃的真空室中干燥过夜,得到Cu-BH@MIP纳米酶。
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