华东理工大学王华磊获国家专利权
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龙图腾网获悉华东理工大学申请的专利一种P450酶突变体、单质粒三酶共表达系统及其在骨化二醇合成中的应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN116875571B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-08-29发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202310642328.2,技术领域涉及:C12N9/02;该发明授权一种P450酶突变体、单质粒三酶共表达系统及其在骨化二醇合成中的应用是由王华磊;柳沁怡;沈亚领设计研发完成,并于2023-06-01向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种P450酶突变体、单质粒三酶共表达系统及其在骨化二醇合成中的应用在说明书摘要公布了:本发明公开了一种P450酶突变体、单质粒三酶共表达系统及其在骨化二醇合成中的应用。P450酶突变体包括:以SEQIDNO.1所示野生型P450酶CYP109E1为模板,分别对第78位的T突变或第81位的G突变,形成的突变体T78A、T78V、T78L和T78I,G81V和G81M,以及同时对第78位的T和第81位的G突变,形成的突变体T78LG81M。本发明还通过构建一种P450酶突变体和氧化还原伴侣的单质粒三酶共表达系统,提高了P450酶羟基化反应中的电子传递效率,可在温和条件下以更高效率合成骨化二醇,解决了P450酶催化合成骨化二醇催化效率以及活力低的问题,具有重要的工业应用价值。
本发明授权一种P450酶突变体、单质粒三酶共表达系统及其在骨化二醇合成中的应用在权利要求书中公布了:1.一种活性提高的催化维生素D3合成骨化二醇的P450酶突变体,其特征在于,以SEQIDNO.1所示野生型的P450酶CYP109E1为模板,第78位氨基酸残基发生如下突变形成的P450酶突变体: 第78位的苏氨酸T突变为丙氨酸A的P450酶突变体T78A,氨基酸序列如SEQIDNO.2所示;或, 第78位的苏氨酸T突变为缬氨酸V的P450酶突变体T78V,氨基酸序列如SEQIDNO.3所示;或, 第78位的苏氨酸T突变为亮氨酸L的P450酶突变体T78L,氨基酸序列如SEQIDNO.4所示;或, 第78位的苏氨酸T突变为异亮氨酸I的P450酶突变体T78I,氨基酸序列如SEQIDNO.5所示。
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