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江西中医药大学钟友宝获国家专利权

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龙图腾网获悉江西中医药大学申请的专利细胞获得性转移诱导结肠炎的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN116034950B

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-08-29发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202310234995.7,技术领域涉及:G01N15/14;该发明授权细胞获得性转移诱导结肠炎的方法是由钟友宝;刘端勇;黄佳琦;张哲言;黄莉;赵海梅设计研发完成,并于2023-03-13向国家知识产权局提交的专利申请。

细胞获得性转移诱导结肠炎的方法在说明书摘要公布了:本发明公开一种细胞获得性转移诱导结肠炎的方法,涉及生物医药技术领域,该细胞获得性转移诱导结肠炎的方法包括如下步骤:S1、结肠炎模型复制:S2、流式分选富集mTh17细胞:S3、mTh17细胞获得性转移诱导结肠炎:S4、结肠炎样品采集:S5、疾病活动指数评定:S6、病理组织的处理:一、石蜡切片;二、苏木素‑伊红染色;通过本申请提供的一种细胞获得性转移诱导结肠炎的方法,在体外获得高表达IL‑17A的记忆性Th17细胞;mTh17细胞获得性转移至SCID小鼠成功诱导结肠炎;这有助于解析mTh17细胞在UC发病中的作用机制,可用于评价新型抗UC药物的疗效,促进新型抗UC药物的开发。

本发明授权细胞获得性转移诱导结肠炎的方法在权利要求书中公布了:1.一种细胞获得性转移诱导结肠炎的方法,其特征在于;包括如下步骤: S1、结肠炎模型复制:BALBc小鼠依次自由饮用2.5%的DSS溶液、自由饮水以及自由饮用2.5%的DSS溶液; S2、流式分选富集mTh17细胞:处理步骤S1中结肠炎BALBc小鼠得到单细胞悬液;染色缓冲液重悬细胞,400gmin离心4min弃上清,重复2次;染色缓冲液重悬细胞,受体阻断剂封闭;分别加入流式抗体CD4、CD73,室温避光孵30min;染色缓冲液重悬细胞,400gmin离心4min弃上清2次;染色缓冲液定容,经流式分选仪检测后,收集管富集结肠炎小鼠mTh17细胞; S3、mTh17细胞获得性转移诱导结肠炎:SCID小鼠适应性饲养后,随机均分成PBS和mTh17组,mTh17组腹腔注射mTh17细胞混合液,PBS组注射等体积的PBS溶液; S4、结肠炎样品采集:收集小鼠结肠并预处理;将结肠组织滤纸吸干后称重;取近端结肠置于4%多聚甲醛溶液中固定24h,余下组织液氮速冻后转移至-80℃冰箱备用; S5、疾病活动指数评定:实验过程中,小鼠称重及观察粪便粘稠度、便血情况,根据体重损失、粪便粘稠度和便血情况的评定疾病活动指数; S6、病理组织的处理:一、石蜡切片:a1、固定结肠组织:将近端结肠置于4%多聚甲醛溶液中固定24h;a2、修块:修剪结肠组织至0.5-1.0cm厚,肠腔与水平面平行;a3、脱水;a4、透明;a5、浸蜡:a6、包埋结肠组织;a7、结肠石蜡切片制备;二、苏木素-伊红染色:b1、脱蜡:采用二甲苯脱蜡8min;b2、梯度酒精复水;b3、苏木素染色;b4.伊红染色;将结肠组织置于伊红染液2min;自来水洗2min;b5、脱水:依次采用95%乙醇浸泡3min;100%乙醇浸泡3min;100%乙醇浸泡3min;b6、透明:采用二甲苯浸泡5min;b7、封片:中性树胶封片,盖上盖玻片;b9、在光学显微镜下采集各组结肠病理图片; 所述S2中流式抗体为CD4、CD73; 所述S3中mTh17组腹腔注射的细胞混合液为:5.0×105个CD4+CD73+mTh17细胞混合液; 所述S6中a4透明采用无水乙醇与二甲苯的体积比为2:1,室温下浸泡15min,无水乙醇与二甲苯的体积比为1:2,室温下浸泡7.5min,二甲苯Ⅰ室温下浸泡3.5min,二甲苯Ⅱ室温下浸泡1.5min。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术,可联系本专利的申请人或专利权人江西中医药大学,其通讯地址为:330000 江西省南昌市湾里区梅岭大道1688号;或者联系龙图腾网官方客服,联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

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