上海理工大学艾连中获国家专利权
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龙图腾网获悉上海理工大学申请的专利一种清除双歧杆菌抗性质粒的基因编辑工具及其应用方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN116004689B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-08-29发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202211013044.9,技术领域涉及:C12N15/74;该发明授权一种清除双歧杆菌抗性质粒的基因编辑工具及其应用方法是由艾连中;宋馨;熊智强;夏永军;王光强设计研发完成,并于2022-08-23向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种清除双歧杆菌抗性质粒的基因编辑工具及其应用方法在说明书摘要公布了:本发明涉及一种清除双歧杆菌抗性质粒的基因编辑工具及其应用方法,基因编辑工具含有两个sgRNA的基因编辑质粒,其中每个质粒包括用于编辑目的基因的sgRNA1和诱导表达靶向质粒中抗性基因、用于消除质粒的sgRNA2,在实施基因编辑过程中,由编辑目的基因的sgRNA1实现基因敲除,编辑完毕后,加入诱导剂以启动靶向质粒中抗性基因的sgRNA2的表达,从而实现基因编辑质粒消除。与现有技术相比,本发明通过采用CRISPR系统,能够有效消除双歧杆菌中的抗性质粒,通过Cas9蛋白对抗性基因的切割造成质粒双链断裂,最终可获得抗性质粒完全消除的稳定菌株,具有简单有效,设备要求与成本较低,质粒清除率高等特点。
本发明授权一种清除双歧杆菌抗性质粒的基因编辑工具及其应用方法在权利要求书中公布了:1.一种清除双歧杆菌抗性质粒的基因编辑工具,其特征在于,所述的基因编辑工具为一个含有两种sgRNA的基因编辑质粒,其中两种sgRNA分别为sgRNA1和sgRNA2, 所述的sgRNA1的启动子为人工合成强启动子P23,P23的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示,用于编辑目的基因; 所述的sgRNA2的启动子为PlacZ,PlacZ的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示,用于诱导表达靶向质粒中抗性基因的sgRNA2,消除质粒。
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