山西医科大学汾阳学院田嵩浩获国家专利权
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龙图腾网获悉山西医科大学汾阳学院申请的专利一种筛选蜂胶提取物中抗肌少症成分的方法及应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN117059161B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-09-02发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202310991149.X,技术领域涉及:G16B15/30;该发明授权一种筛选蜂胶提取物中抗肌少症成分的方法及应用是由田嵩浩;姜玉锁设计研发完成,并于2023-08-08向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种筛选蜂胶提取物中抗肌少症成分的方法及应用在说明书摘要公布了:本发明公开了一种筛选蜂胶提取物中抗肌少症成分的方法及应用,过程包括:蜂胶提取物作用靶点基因筛选;肌少症的基因靶点的获取;绘制VENNY图,导入STRING数据库,得到蛋白间的相互作用信息,将STRING数据库中获得的数据导入Cytoscape3.9.1软件得到每个靶点的Degree值;PE作用于肌少症的靶点基因富集分析;分子对接;通过D‑gal诱导的C2C12细胞模型验证预测结果;通过该方法,发现蜂胶提取物中的有效成分为芹菜素,发现了芹菜素对肌少症的防治作用,为临床上肌少症的治疗提供了理论基础。
本发明授权一种筛选蜂胶提取物中抗肌少症成分的方法及应用在权利要求书中公布了:1.一种筛选蜂胶提取物中抗肌少症成分的方法,其特征在于,过程包括: (1)蜂胶提取物作用靶点基因筛选; (2)肌少症的基因靶点的获取; (3)使用BioVenn在线平台获得药物靶点与疾病靶点交集靶点并绘制VENNY图,然后将交集靶点导入STRING数据库,将物种限制为Homosapiens,最低要求的作用值设置为mediumconfidence,得到蛋白间的相互作用信息,将STRING数据库中获得的数据导入Cytoscape3.9.1软件得到每个靶点的Degree值; (4)将交集靶点输入DAVID数据库,物种限定为Homosapiens,进行GO功能富集分析和KEGG通路富集;以P0.05为基本标准,筛选GO功能富集分析通路,以条形图的形式展示结果;以P0.01为基本标准,筛选KEGG功能富集分析通路,以气泡图的形式展示结果;将GO富集分析结果、交集靶点和交集靶点对应的蜂胶提取物成分信息导入Cytoscape3.9.1软件进行拓扑分析,构建PE“成分-靶点-通路”网络,根据Degree网络拓扑参数判断PEE的核心靶点和主要活性成分; (5)在PubChem数据库下载PEE成分中的主要活性成分和核心靶点蛋白的3D结构,通过AutoDock软件进行分子对接,根据低能量和构象合理的原则选择最佳对接构象,并计算PEE主要活性成分与核心靶点的结合能力; (6)通过D-gal诱导的C2C12细胞模型验证预测结果; 步骤(1)中,蜂胶提取物作用靶点基因筛选具体为:依据蜂胶提取物的成分信息,从PubChem数据库获取其InChI结构信息;将这些信息输入BATMAN数据库,“Scorecutoff”设置为20,P-value设置为0.05,确定PE成分的作用靶点; 步骤(6)中,通过D-gal诱导的C2C12细胞模型验证预测结果具体为: C2C12细胞中加入生长培养基,所述生长培养基的组成为高糖DMEM培养基+10%胎牛血清,于37℃,5%CO2的恒温培养箱中孵育;培养细胞至85%左右,收集细胞并分组,分为对照组(Ctrl)、衰老模型组(D-gal)、筛选成分组(D-gal+Screeningcomponents);随后将各组培养基换为分化培养基,所述分化培养基的组成为高糖DMEM培养基+2%马血清,根据试验目的,在试验结束前向生长分化培养基中添加D-gal、筛选得到的成分等药物处理,衰老模型组向培养基中加浓度为111mM的D-gal,处理时间为48h,筛选成分组先向培养基中加2.5μM筛选成分组处理24h,之后换成含111mM的D-gal的培养基处理48h,然后CCK-8检测不同组细胞的活力,WesternBlotting检测筛选靶点对衰老细胞模型的作用效果。
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