中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)胡青海获国家专利权
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龙图腾网获悉中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)申请的专利基于ERA-CRISPR/Cas12a一步法快速检测鸡毒支原体的试剂盒、应用及方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119710049B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-09-05发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202411980954.3,技术领域涉及:C12Q1/689;该发明授权基于ERA-CRISPR/Cas12a一步法快速检测鸡毒支原体的试剂盒、应用及方法是由胡青海;张行雨;王诗琪;郑雨婷;王佳玲;张笑莹;廖洪艳设计研发完成,并于2024-12-31向国家知识产权局提交的专利申请。
本基于ERA-CRISPR/Cas12a一步法快速检测鸡毒支原体的试剂盒、应用及方法在说明书摘要公布了:本发明公开了基于ERA‑CRISPRCas12a一步法快速检测鸡毒支原体的试剂盒、应用及方法,本发明的鸡毒支原体可视化检测试剂盒,是基于鸡毒支原体新的核酸检测靶标hmpG1,待检样品先用裂解buffer裂解释放基因组DNA后,在恒温水浴锅或金属浴中进行ERA‑CRISPRCas12a一锅法反应,在crRNA引导序列介导下,LbCas12a酶与crRNA、靶标DNA结合形成三元复合物后,会激活cas12a的反式剪切活性,可任意切割反应体系中的ssDNA荧光探针以释放该探针上的荧光集团,然后用紫外灯检测荧光信号或用胶体金试纸条检测FAM及Biotin基团是否被切下进行结果判定。本发明快速检测鸡毒支原体的ERA‑CRISPRcas12a一锅法技术,通过ERA扩增及CRISPRcas12a特异性识别鸡毒支原体DNA靶标并切割,特异性强,检测灵敏度低至1.73pgμL,可用于现场快速检测临床样品中的鸡毒支原体。
本发明授权基于ERA-CRISPR/Cas12a一步法快速检测鸡毒支原体的试剂盒、应用及方法在权利要求书中公布了:1.基于ERA-CRISPRCas12a一步法快速检测鸡毒支原体的试剂盒,其特征在于,包括样品裂解buffer、反应buffer、ERA引物、crRNA引导序列、Cas12a酶、ssDNA荧光探针和胶体金试纸条; 所述ERA引物的核苷酸序列为: F:5’-TTTTATTAGCATAATCTCCACCTGAGCATGA-3’, R:5’-GTAAGATATAACCAAGCCCTTTTAGTGAATC-3’; 所述crRNA引导序列为: 5’-UAAUUUCUACUAAGUGUAGAUCAAUUGUUUAUUUGAACCCAAUC-3’。
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