广东省中医院海南医院刘阳桦获国家专利权
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龙图腾网获悉广东省中医院海南医院申请的专利一种蛋白检测方法及检测制剂获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN120254244B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-09-19发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202510410459.7,技术领域涉及:G01N33/543;该发明授权一种蛋白检测方法及检测制剂是由刘阳桦;林美幸;吴青珊设计研发完成,并于2025-04-02向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种蛋白检测方法及检测制剂在说明书摘要公布了:本发明提供一种蛋白检测方法及检测制剂,通过介孔二氧化硅‑氧化石墨烯复合纳米多孔材料实现目标蛋白的高效富集,结合靶向抗体修饰的磁性纳米颗粒完成特异性免疫捕获,并利用三维水凝胶抗体阵列的微流控芯片实现单分子分离。信号放大采用酶标二抗‑金纳米棒偶联物,通过等离子体共振效应增强荧光信号,结合卷积神经网络算法校正背景噪声,显著提升检测可靠性;实验表明,该方法检测限低至0.12pgmL,线性范围覆盖0.5‑100,000pgmL,单细胞检测误差±7.8%,批次重复性CV=4.2%,非特异性吸附率仅1.1%,检测时间缩短至1.2小时。本发明检测方法适用于肿瘤标志物的超灵敏检测,尤其在CTCs原位分析中具有临床应用潜力。
本发明授权一种蛋白检测方法及检测制剂在权利要求书中公布了:1.一种蛋白检测方法,其特征在于,包括以下步骤: S1、样本预处理:将待测样本与介孔二氧化硅-氧化石墨烯复合纳米多孔材料混合,所述纳米多孔材料的孔径为5-10nm,表面接枝聚乙二醇链,分子量为2000-5000Da,选择性富集目标蛋白; S2、免疫反应:加入表面修饰有靶向抗体的磁性纳米颗粒,形成抗体-抗原-纳米颗粒复合物; S3、微流控分离:将复合物注入集成有三维水凝胶抗体阵列的微流控芯片,通过磁场驱动实现单分子捕获; S4、信号放大:加入酶标二抗-金纳米棒偶联物,金纳米棒长径比为3:1-5:1,所述酶标二抗为HRP-羊抗鼠IgG,所述酶标二抗-金纳米棒偶联物表面修饰BSA,通过局域表面等离子体共振增强荧光信号; S5、定量检测:基于电化学发光技术检测信号强度,结合机器学习算法校正背景干扰,所述机器学习算法为基于卷积神经网络算法的信号处理模型,输入参数包括ECL光谱特征、反应时间曲线和芯片温度数据,输出目标蛋白浓度,检测限为0.12pgmL。
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