南京大学杨柳燕获国家专利权
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龙图腾网获悉南京大学申请的专利一种从蓝藻中提取稳定体的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119193407B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-09-19发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202411443660.7,技术领域涉及:C12N1/20;该发明授权一种从蓝藻中提取稳定体的方法是由杨柳燕;王梦梦;王晨宇;宋晓华设计研发完成,并于2024-10-16向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种从蓝藻中提取稳定体的方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种从蓝藻中提取稳定体的方法,包括如下步骤:S1.蓝藻培养;S2.蓝藻预处理;S3.超声破碎;S4.差速离心;S5.超滤;S6.超速离心;S7.密度梯度离心;S8.去除外周蛋白。本发明提供的提取方法提取效率高、流程稳定可控、无毒副产物产生,绿色环保,且无需高温高压装置和大型仪器设备,扩展了应用场景,降低了应用成本。本发明可获得高polyPn聚合度、高浓度和高纯度的稳定体活性颗粒生物材料,且生物活性高,不仅可满足食品、日化等领域的应用要求,还满足应用于临床医疗和科研时的严格要求,具有非常大的实际应用价值和商业前景。将解决国内制备稳定体活性颗粒生物材料的技术难题。
本发明授权一种从蓝藻中提取稳定体的方法在权利要求书中公布了:1.一种从蓝藻中提取稳定体的方法,其特征在于,包括如下步骤: S1.蓝藻培养:将蓝藻接种于蓝绿水藻培养基中培养,固液分离,收集蓝藻; S2.蓝藻预处理:将步骤S1得到的蓝藻经洗涤,固液分离,收集蓝藻; S3.超声破碎:将步骤S2得到的蓝藻重悬于与蓝藻等渗的盐溶液中,超声破碎,得到蓝藻匀浆;所述的超声,其频率为20~25kHz,超声时间为5~10min; S4.差速离心:将步骤S3得到的蓝藻匀浆经差速离心处理,得到初步分离液;所述的差速离心,条件为:将步骤S3得到的蓝藻匀浆300~600g离心10~20min,收集上清液,1000~3000g离心10~20min,收集上清液,6000~12000g离心20~40min,收集上清液; S5.超滤:将步骤S4得到的初步分离液经过滤,超滤,收集浓缩液,即得稳定体粗提物;所述的过滤为经0.45μm和0.22μm的水系滤膜过滤;所述超滤,其超滤膜的截留分子量为100kDa; S6.超速离心:将步骤S5得到的浓缩液重悬于NaCl水溶液或缓冲液中,超速离心,沉淀重悬于碘克沙醇水溶液中,得重悬液;所述超速离心,其温度为4~10℃,离心力为120000~150000g,离心时间为1~2h; S7.密度梯度离心:将浓度分别为50%wv、45%wv、40%wv、35%wv、30%wv、25%wv、20%wv、15%wv、10%wv、8%wv、5%wv和2%wv的碘克沙醇水溶液按照浓度从高到低的顺序依次加入超速离心管中,再向超速离心管中加入步骤S6得到的重悬液,超速离心,收集浓度为10%wv的碘克沙醇悬液;所述超速离心,其温度为4~10℃,离心力为120000~150000g,离心时间为1~2h; S8.去除外周蛋白:将步骤S7得到的10%wv的碘克沙醇悬液与Tween20混合,室温振荡,超滤,得到的超滤浓缩液用NaCl水溶液或缓冲液重悬,超滤,收集浓缩液即得高纯度的稳定体提取物。
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