苏州可尔生命科技有限公司齐飞虎获国家专利权
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龙图腾网获悉苏州可尔生命科技有限公司申请的专利一种基于Dda解旋酶的恒温核酸扩增方法、反应体系获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN120425030B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-09-23发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202510868566.4,技术领域涉及:C12Q1/6844;该发明授权一种基于Dda解旋酶的恒温核酸扩增方法、反应体系是由齐飞虎;吴菊;束艳方设计研发完成,并于2025-06-26向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种基于Dda解旋酶的恒温核酸扩增方法、反应体系在说明书摘要公布了:本发明涉及分子生物学技术领域,具体涉及一种基于Dda解旋酶的恒温核酸扩增方法、反应体系,反应体系包括核心酶混合液、缓冲液、RNA修饰引物混合物、荧光检测探针混合物以及ATPADP混合液、dNTPs混合液;所述核心酶混合液包括Dda解旋酶、MutS蛋白、RNaseH2和BstDNA聚合酶。构建MutS蛋白错配检测、RNA修饰引物控制和RNaseH2特异性切割的三重保障机制,使该核酸扩增方法具备卓越的特异性、超强的多重检测能力、极高的检测敏感性;该核酸扩增方法的操作更加便捷,更适合标准化应用,其总反应时间也更短,无需复杂的温度循环,更适合现场快速检测;解决了现有恒温核酸扩增技术的特异性不足、扩增效率低等问题。
本发明授权一种基于Dda解旋酶的恒温核酸扩增方法、反应体系在权利要求书中公布了:1.一种基于Dda解旋酶的恒温核酸扩增反应体系,其特征在于,反应体系包括核心酶混合液、缓冲液、RNA修饰引物混合物、荧光检测探针混合物以及ATPADP混合液、dNTPs混合液; 其中,所述核心酶混合液包括Dda解旋酶、MutS蛋白、RNaseH2和BstDNA聚合酶;所述Dda解旋酶、所述MutS蛋白与所述RNaseH2相互协同构建形成三重保障机制;所述反应体系中,所述Dda解旋酶的浓度为4-8UμL,所述MutS蛋白的浓度为0.5~1.2μM,所述RNaseH2的浓度为0.2~0.5UμL,所述BstDNA聚合酶的浓度为8~16UμL; 所述RNA修饰引物混合物中,RNA修饰引物的结构为5'-DNA序列1-核糖核苷酸-DNA序列2-3';其中,所述核糖核苷酸为rA、rU、rG、rC中的任意一种或多种; 所述DNA序列1长度为8~15个核苷酸; 所述核糖核苷酸与3'端之间间隔有8~12个核苷酸。
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