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宁波大学乔朝晖获国家专利权

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龙图腾网获悉宁波大学申请的专利基于Ag-MoS2纳米酶的比色-荧光双信号检测沙门氏菌的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN120427903B

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-09-26发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202510929580.0,技术领域涉及:G01N33/569;该发明授权基于Ag-MoS2纳米酶的比色-荧光双信号检测沙门氏菌的方法是由乔朝晖;鲍朝辉;王珍;薛靓靓;肖文雪;金育安设计研发完成,并于2025-07-07向国家知识产权局提交的专利申请。

基于Ag-MoS2纳米酶的比色-荧光双信号检测沙门氏菌的方法在说明书摘要公布了:本发明公开了基于Ag‑MoS2纳米酶的比色‑荧光双信号检测沙门氏菌的方法,特点是包括将单链S1、单链S2、单链S3、单链S4、沙门氏菌适配体和cDNA混合制备得到多价适配体竞争性探针溶液的步骤;将发夹探针H1和发夹探针H2分别溶解在PBS的步骤;制备Ag‑MoS2纳米酶复合材料的步骤;将待测沙门氏菌溶液与多价适配体竞争性探针混合孵育后,加入Ag‑MoS2纳米酶复合材料进行CHA扩增反应,然后加入H2O2溶液和TMB溶液进行过氧化物酶催化反应,分别进行比色法和荧光法的检测,计算得到待测溶液中沙门氏菌浓度的步骤,优点是简便快速、灵敏度高、特异性强、准确性高且实现检测后实时灭菌。

本发明授权基于Ag-MoS2纳米酶的比色-荧光双信号检测沙门氏菌的方法在权利要求书中公布了:1.一种基于Ag-MoS2纳米酶的比色-荧光双信号检测沙门氏菌的方法,本方法不以诊断或治疗为目的,其特征在于包括以下步骤: 步骤1、TDN探针的制备: 将25µM的单链S1溶液、25µM的单链S2溶液、25µM的单链S3溶液、25µM的单链S4溶液、10µM的沙门氏菌适配体溶液、10µM的cDNA溶液和TM缓冲液按体积比1:1:1:1:10:10:26的比例混合后退火处理,得到多价适配体竞争性探针溶液;其中 所述的单链S1的核苷酸序列为SEQIDNO.1所示:5'-TCGATGACCCACTCTCACTTTATCACCAGGTCAGTCTGACAGTGTAGCAGAGCTGTAGATAGATGCTGAGGAGTCCAATAC-3'; 所述的单链S2的核苷酸序列为SEQIDNO.2所示:5'-TCGATGACCCACTCTCACTTTCAGACTGACCTGGTGATAAAACGACACTGACGTGGTGAATCTACTATGTGCGTGCATCTC-3'; 所述的单链S3的核苷酸序列为SEQIDNO.3所示:5'-TCGATGACCCACTCTCACTTTTCAGACTGTAGGAAGTGTGCTTCACCACGTCAGTGTCGTTTGTATTGGACTCCTCAGCAT-3'; 所述的单链S4的核苷酸序列为SEQIDNO.4所示:5'-GTGAGAGTGGGTCATCGAAAAAACTCCTCTGACTGTAACCACGGTGGTTTGATCACTATTGGGCCTTTCTGATGTCGGTAGT-3'; 所述的沙门氏菌适配体的核苷酸序列为SEQIDNO.5所示:5'-GTGAGAGTGGGTCATCGAAAAAACTCCTCTGACTGTAACCACGGTGGTTTGATCACTATTGGGCCTTTCTGATGTCGGTAGT-3'; 所述的cDNA的核苷酸序列为SEQIDNO.6所示:5'-CAAACCACCGTGGTTACAGT-3'; 步骤2、发夹探针的制备: 将发夹探针H1溶解在PBS缓冲液后进行退火处理,得到浓度为1.5μM的H1溶液;将发夹探针H2溶解在PBS缓冲液后进行退火处理,得到浓度为1μM的H2溶液,其中所述的发夹探针H1的核苷酸序列为SEQIDNO.7所示:5'-FAM-ACCGTGGTTACAGTCCATGTGTAGAACTGTAACCACGGTGGTT-BHQ-3’,所述的发夹探针H2的核苷酸序列为SEQIDNO.8所示:5'-TGGTTACAGTTCTACACATGGACTGTAACCACGGTAGTCCATGTGTAGA-3'; 步骤3、Ag-MoS2纳米酶复合材料的制备: 将浓度为2mgmL的MoS2溶液与5mMAgNO3溶液按体积比1:1的比例混合后,加入MoS2质量0.05-0.2%的柠檬酸三钠搅拌后,离心分离取沉淀,用乙醇和去离子水反复洗涤后干燥得到Ag-MoS2纳米材料,将H1溶液、H2溶液与1mgmL的Ag-MoS2纳米材料溶液混合后孵育,得到Ag-MoS2纳米酶复合材料; 步骤4、荧光法检测沙门氏菌: 取待测样品加入步骤1制备得到的多价适配体竞争性探针溶液中,在室温下孵育1小时,然后加入步骤3制备得到的Ag-MoS2纳米酶复合材料,在室温下孵育30分钟进行CHA反应,得到CHA反应产物,用酶标仪在激发波长为492nm,发射波长为518nm处记录产生的荧光信号,根据荧光强度与沙门氏菌浓度之间的定量关系,计算获得待测样品中沙门氏菌的浓度; 步骤5、比色法检测沙门氏菌: 在步骤4得到的CHA反应产物中继续加入50mMH2O2溶液和50mMTMB溶液进行过氧化物酶催化反应,用酶标仪在635nm处测量吸光度,根据吸光度值与沙门氏菌浓度之间的定量关系,计算获得待测样品中沙门氏菌的浓度。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术,可联系本专利的申请人或专利权人宁波大学,其通讯地址为:315211 浙江省宁波市江北区风华路818号;或者联系龙图腾网官方客服,联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

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