湖北省农业科学院畜牧兽医研究所周丹娜获国家专利权
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龙图腾网获悉湖北省农业科学院畜牧兽医研究所申请的专利一种非洲猪瘟病毒检测用试剂盒及荧光定量PCR检测方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119101768B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-09-26发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202311026664.0,技术领域涉及:C12Q1/70;该发明授权一种非洲猪瘟病毒检测用试剂盒及荧光定量PCR检测方法是由周丹娜;彭西甜;杨福荣;田永祥;李畅;杨克礼;刘泽文;刘威;高婷;袁芳艳;郭锐;吴琼;朱佳佳设计研发完成,并于2023-08-15向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种非洲猪瘟病毒检测用试剂盒及荧光定量PCR检测方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种非洲猪瘟病毒检测用试剂盒及荧光定量PCR检测方法,属于试剂盒及病毒检测技术领域。该试剂盒包括非洲猪瘟病毒捕获探针VP72‑CP、与VP72‑CP化学结合的[P6,6,6,14 +][Cohfacac3 ‑]材料,以及非猪瘟病毒荧光定量PCR检测用特异性和探针。本发明中捕获探针与磁性离子液体材料锚定结合,结合后的捕获材料能够特异性识别并吸附捕获非洲猪瘟病毒核酸,并通过荧光定量PCR检测方法用于检测非洲猪瘟病毒的含量,具有良好的敏感性、特异性和重复性。
本发明授权一种非洲猪瘟病毒检测用试剂盒及荧光定量PCR检测方法在权利要求书中公布了:1.一种非诊断目的的非洲猪瘟病毒荧光定量PCR检测方法,其特征在于,该方法包括如下步骤: (1)将非洲猪瘟病毒捕获探针和[P6,6,6,14 +][Cohfacac3 -]材料按照体积比为10:1混合,30-80℃孵育5min-10min,去除未结合物,得到孵育产物;所述非洲猪瘟病毒捕获探针的核苷酸序列为: 5’-C20-CACAAGCCGCACCAAAGCAAACCT-3’; (2)向所述孵育产物中加入待测样本,热变性后调节体系的pH=6-10,NaCl浓度为0.1molL,于56-60℃捕获5min-10min,去除未结合物,得到捕获产物; (3)向所述捕获产物加入解吸液,70-90℃加热15min-25min进行DNA解吸,去除捕获产物,得到解吸产物; (4)将非猪瘟病毒荧光定量PCR检测用特异性引物和探针加入到荧光定量PCR反应体系中,然后加入所述解吸产物,进行目的序列的扩增,测定解吸产物的Ct值; 所述非猪瘟病毒荧光定量PCR检测用特异性引物的核苷酸序列为: 上游引物:5’-GGCCCTCTCCTATGCAACATTC-3’ 下游引物:5’-GGGTTGGTATGGCTACACGTTC-3’ 所述非猪瘟病毒荧光定量PCR检测用探针的核苷酸序列为: 5’-FAM-CACAAGCCGCACCAAAGCAAACCT-BHQ1-3’。
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