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龙图腾网获悉北京工业大学申请的专利一种基于抗体偶联DNA纳米团簇探针的RNA m6A修饰单细胞多模态分析方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN119595603B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-09-30发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202411686070.7，技术领域涉及：G01N21/64；该发明授权一种基于抗体偶联DNA纳米团簇探针的RNA m6A修饰单细胞多模态分析方法是由任晓君;吴一凡;高学云设计研发完成，并于2024-11-24向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种基于抗体偶联DNA纳米团簇探针的RNA m6A修饰单细胞多模态分析方法在说明书摘要公布了：本发明提供了一种基于抗体偶联DNA纳米团簇探针的RNAm6A修饰单细胞多模态分析方法，可实现m6A修饰的荧光成像、质谱定量以及同步辐射高分辨成像，获取有关m6A修饰的单细胞、空间定位和定量等多维度信息。本方法在m6A抗体的Fc区域特异性添加叠氮基团，最大限度减少抗原结合位点的破坏，并通过点击化学反应偶联金属纳米团簇。利用金属纳米团簇的荧光性质实现对m6A修饰的荧光原位成像；利用探针中的银元素，耦合激光剥蚀电感耦合等离子体质谱仪LA‑ICP‑MS实现单细胞定量；以及结合同步辐射X射线进行高分辨同步辐射成像。本发明具有特异性高、单细胞分辨、高空间分辨以及多尺度解析等优点。

本发明授权一种基于抗体偶联DNA纳米团簇探针的RNA m6A修饰单细胞多模态分析方法在权利要求书中公布了：1.一种基于抗体偶联DNA纳米团簇探针的RNAm6A修饰单细胞多模态分析方法，其特征在于，包括以下步骤： 以发卡DNA为模板，加入硝酸银溶液，充分搅拌后加入硼氢化钠溶液，使其还原生成DNA纳米团簇，并发射红色荧光； 构建Fc区域特异性添加叠氮基团的m6A单克隆抗体，并通过点击化学反应在抗体上连接炔烃‑PEG‑活性酯ALK‑PEG‑NHS； 通过n‑羟基琥珀酰亚胺NHS与氨基的偶联反应，在单克隆抗体上添加一条DNA纳米团簇靶向序列NH2‑DNA，将DNA纳米团簇与靶向序列进行杂交，构建抗体偶联DNA纳米团簇探针； 用NaAsO2处理诱导ACE2‑HEK293T细胞，在细胞质中产生应激颗粒；以应激颗粒核心蛋白G3BP1为标志，在应激颗粒中，观察m6A修饰的RNA与G3BP1的共定位信号； 将构建的抗体偶联DNA纳米团簇探针导入NaAsO2处理诱导的细胞中，通过抗体对m6A RNA进行识别，在激光共聚焦显微镜下原位观察单细胞中m6ARNA； 同时利用激光消蚀电感耦合等离子质谱LA‑ICP‑MS定量单细胞内的银原子浓度，然后通过标准曲线及定量公式得到单细胞内m6ARNA的表达量； 以及结合同步辐射软X射线谱学显微光束线站，利用该线站的扫描透射X射线显微术STXM进行细胞的扫描透射成像； 发卡DNA序列为：TATCCGTCCTCCTTCCTCCACGGATAAATAAATAAATAAATAAATAA；NH2‑DNA序列为：NH2‑CAAATAGTCATTATTTATTTATTTATTTATTT； 步骤2中，所述点击化学反应条件为：加入1mgml单克隆抗体溶液8μL、25mM ALK‑PEG‑NHS溶液20μL、1mM CuSO4溶液10μL、5mM抗坏血酸钠溶液10μL、2mM BTTAA溶液5μL,在氮气环境下，40℃搅拌过； 步骤3中，所述偶联反应条件为：取步骤2中溶液2μL、25μM NH2‑DNA溶液2μL、DMSO 10μL、300 mM Na2CO3溶液2μL、DEPC水4μL，反应温度为28℃，反应时间为30 min。

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