杭州佳嘉乐生物技术有限公司;浙江省农业科学院王新全获国家专利权
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龙图腾网获悉杭州佳嘉乐生物技术有限公司;浙江省农业科学院申请的专利一种高效表达酰胺酶的方法及其应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN120041427B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-09-30发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202510519890.5,技术领域涉及:C12N9/80;该发明授权一种高效表达酰胺酶的方法及其应用是由王新全;王金城;狄珊珊;焦松;齐沛沛;陈棋清;赵慧宇;戴坤设计研发完成,并于2025-04-22向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种高效表达酰胺酶的方法及其应用在说明书摘要公布了:本发明提供了一种高效表达酰胺酶的方法及其应用,属于酶技术以及基因工程技术领域。所述方法包括以下步骤:A1、将用于增强酰胺酶表达的融合标签编码序列克隆至大肠杆菌表达载体中获得第一重组表达载体;A2、将酰胺酶编码序列克隆至第一重组表达载体中以构建第二重组表达载体,所述酰胺酶与融合标签融合表达且酰胺酶位于融合标签下游;A3、将第二重组表达载体导入大肠杆菌感受态细胞中,构建重组基因工程菌;A4、对得到的重组基因工程菌进行发酵以表达酰胺酶。本发明所述方法利用融合标签显著提高了酰胺酶的表达量,利用制备得到的酰胺酶可以生成高光学纯度的手性烷基苯胺,得到的化合物e.e.值大于97%。
本发明授权一种高效表达酰胺酶的方法及其应用在权利要求书中公布了:1.一种表达酰胺酶的方法在制备手性烷基苯胺中的应用,其特征在于,所述方法包括以下步骤: A1、将用于增强酰胺酶表达的融合标签编码序列克隆至大肠杆菌表达载体中获得第一重组表达载体,所述融合标签由SEQ ID No.1所示的DNA序列编码; A2、将酰胺酶编码序列克隆至步骤A1得到的第一重组表达载体中以构建第二重组表达载体,所述酰胺酶与融合标签融合表达且酰胺酶位于融合标签下游; A3、将步骤A2中构建的第二重组表达载体导入大肠杆菌感受态细胞中,构建重组基因工程菌; A4、对步骤A3得到的重组基因工程菌进行发酵以表达酰胺酶; 所述酰胺酶的氨基酸序列选自SEQ ID No.2‑SEQ ID No.10中的任意一种。
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