福建医科大学董海燕获国家专利权
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龙图腾网获悉福建医科大学申请的专利一种基于靶标诱导MOF生长策略的超灵敏电化学传感器及其构建与应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN116698944B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-10-03发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202310674868.9,技术领域涉及:C12Q1/68;该发明授权一种基于靶标诱导MOF生长策略的超灵敏电化学传感器及其构建与应用是由董海燕;庄君阳;黄蓉设计研发完成,并于2023-06-08向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种基于靶标诱导MOF生长策略的超灵敏电化学传感器及其构建与应用在说明书摘要公布了:本发明公开一种基于靶标诱导MOF生长策略的超灵敏电化学传感器及其构建与应用。所述超灵敏电化学传感器的构建按如下步骤进行:裸金电极的活化;链霉亲和素磁珠的预处理;特异性捕获靶标;miRNA多聚A延伸;金属有机框架电极的组装;差分脉冲伏安法检测。本发明无需引物、特异性酶的加入,直接在反应体系中添加E.coliPolyA聚合酶即可直接在miRNA‑21的末端聚合出多A序列,促进miRNA‑21与电极表面的吸附,诱导MOF的生长,从而实现对miRNA‑21的超灵敏检测。
本发明授权一种基于靶标诱导MOF生长策略的超灵敏电化学传感器及其构建与应用在权利要求书中公布了:1.一种基于靶标诱导MOF生长策略的超灵敏电化学传感器的构建方法,其特征在于:包括以下步骤: 1用氧化铝粉抛光裸金电极,依次在ddH2O、无水已醇、ddH2O中超声清洗,氮气吹干;之后将电极置于0.5M硫酸溶液中以0.1Vs的扫描速率在‑0.2~+1.6V电位间进行循环伏安扫描,至循环伏安曲线稳定后将电极取出用ddH2O冲洗干净,氮气吹干,得到活化后的金电极; 2将20µl 10mgml链霉亲和素磁珠溶液涡旋振荡20s,得到分散均匀的磁珠分散液; 移取20µl磁珠分散液,磁分离后弃上清,用Buffer I清洗磁珠2次;而后向磁珠中加入80µl Buffer I、20µl 10µM生物素化捕获探针溶液,涡旋振荡30min,磁分离后弃上清,用Buffer I清洗磁珠3次;再向磁珠中加入10µl 5×SSC溶液,得到预处理后的磁珠重悬液; 3取10µl步骤2预处理后的磁珠重悬液,加入10µl 靶标序列,旋转混合15min,磁分离后弃上清,用Buffer I清洗沉淀2次,而后向沉淀中加入7.5µl Rnase‑free water,再在95℃加热2min,立即磁分离,收集得到含靶标序列的上清液; 4将1µl 10×E.coli PolyA Polymerase Reaction Buffer、1µl 10mM ATP、1µl E.coli PolyA Polymerase、7.5µl步骤3收集的含靶标序列的上清液混合均匀,于37℃孵育10min,加入20µl 5×SSC溶液,得到具polyA尾靶标溶液; 5移取5µl步骤4得到的具polyA尾靶标溶液,滴加在步骤1活化后的金电极上,室温孵育10min;而后在电极上滴加3µl 40mM硝酸锌溶液,再滴加3µl 160mM 2‑甲基咪唑溶液, 室温孵育30min,ddH2O冲洗电极表面,氮气吹干,得到MOF组装电极; 6将步骤5得到的MOF组装电极置于电化学检测液中,用差分脉冲伏安法扫描; 其中,所述生物素化捕获探针的序列为:5'‑TTCAACATCAGTCTGATAAGCTATTT‑3'‑biotin。
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