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广州中医药大学(广州中医药研究院);四川省药品检验研究院(四川省医疗器械检测中心、四川养麝研究所)许宗颖获国家专利权

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龙图腾网获悉广州中医药大学(广州中医药研究院);四川省药品检验研究院(四川省医疗器械检测中心、四川养麝研究所)申请的专利一种结肠组织中乌梅的有机酸代谢产物含量测定方法及应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN120594728B

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-10-21发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202511101021.7,技术领域涉及:G01N30/88;该发明授权一种结肠组织中乌梅的有机酸代谢产物含量测定方法及应用是由许宗颖;刘兴兰;杨剑设计研发完成,并于2025-08-07向国家知识产权局提交的专利申请。

一种结肠组织中乌梅的有机酸代谢产物含量测定方法及应用在说明书摘要公布了:本发明公开了一种结肠组织中乌梅的有机酸代谢产物含量测定方法及应用。该测定方法包括如下步骤:1向结肠组织中加入灭菌生理盐水,研磨,加入甲醇继续研磨,离心,取上清,再加入甲醇涡旋,离心,最后加水涡旋,得到待测样品溶液;2采用高效液相色谱‑质谱联用方法,利用枸橼酸、苹果酸和奎宁酸标准品绘制三种有机酸的标准曲线,其中枸橼酸用正离子模式,苹果酸和奎宁酸用负离子模式;3采用相同的方法检测待测样品,可根据标准曲线计算得到三种有机酸代谢产物枸橼酸、苹果酸、奎宁酸的浓度或含量。本发明方法简单、灵敏度高,能用于乌梅作用于溃疡性结肠炎的机制研究。

本发明授权一种结肠组织中乌梅的有机酸代谢产物含量测定方法及应用在权利要求书中公布了:1.一种结肠组织中乌梅的有机酸代谢产物含量测定方法,其特征在于,包括如下步骤: 1结肠组织前处理: 向结肠组织中加入灭菌生理盐水,研磨,然后加入甲醇继续研磨,离心,取上清,得到上清液I;再加入甲醇涡旋,离心,得到上清液II;最后加水涡旋,得到待测样品溶液; 2绘制三种有机酸的标准曲线: 将枸橼酸、苹果酸和奎宁酸用甲醇水溶液配制成浓度梯度的标准曲线工作溶液,然后采用高效液相色谱-质谱联用方法进行检测,其中枸橼酸用正离子模式,苹果酸和奎宁酸用负离子模式,获得各有机酸的色谱峰面积,再分别以峰面积为纵坐标Y,标准曲线工作溶液的质量浓度为横坐标X,绘制标准曲线,分别得到枸橼酸、苹果酸和奎宁酸的线性方程; 3测定三种有机酸的含量: 将步骤1中得到的待测样品溶液采用高效液相色谱-质谱联用方法进行检测,其中枸橼酸用正离子模式,苹果酸和奎宁酸用负离子模式,获得各有机酸的色谱峰面积,再代入步骤2中得到的线性方程,分别计算得到枸橼酸、苹果酸、奎宁酸的浓度和或含量; 步骤2和3中所述的高效液相色谱的参数条件如下:色谱柱AgilentZORBAXRx-C18,4.5×150mm,5μm;流动相A为含体积百分比0.1%的甲酸水溶液,流动相B为甲醇,梯度洗脱为:0~5min,5%B;5~7min,5%~80%B;7~8min,80%~5%B;9min,5%B;柱温:35~40℃;流速:0.2~0.4mLmin;进样量:1~3μL; 步骤2和3中所述的质谱的参数条件如下:电喷雾电离离子源ESI,离子源温度:550℃,雾化器压力50Pa;毛细管电压4500V;碰撞气体:高纯氮气,碰撞气压力Medium;电离模式:电喷雾,正负离子模式,多反应监测MRM模式,离子对为:枸橼酸Q1为193.100,Q3为111.000,DP为40V,CE为24V,EP为10V,CXP为11V;苹果酸Q1为133.000,Q3为115.000,DP为-50V,CE为-15V,EP为-10V,CXP为-16V;奎宁酸Q1为191.100,Q3为93.000,DP为-90V,CE为-29V,EP为-10V,CXP为-16V。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术,可联系本专利的申请人或专利权人广州中医药大学(广州中医药研究院);四川省药品检验研究院(四川省医疗器械检测中心、四川养麝研究所),其通讯地址为:510006 广东省广州市番禺区大学城外环东路232号;或者联系龙图腾网官方客服,联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

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