南京大学江德臣获国家专利权
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龙图腾网获悉南京大学申请的专利单个活细胞表面抗原的超分辨电化学成像方法及装置获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN115372436B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-10-24发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202210999632.8,技术领域涉及:G01N27/327;该发明授权单个活细胞表面抗原的超分辨电化学成像方法及装置是由江德臣;金融设计研发完成,并于2022-08-19向国家知识产权局提交的专利申请。
本单个活细胞表面抗原的超分辨电化学成像方法及装置在说明书摘要公布了:本申请提供一种单个活细胞表面抗原的超分辨电化学成像装置及方法,通过构建一种全新的单细胞表面抗原电化学分析系统。该系统具有高稳定性以及空间分辨率,XY方向空间分辨率达到了30nm,Z方向空间分辨率低于5nm。利用这一系统,实现了SICM在生物成像方面的应用,开发了基于电化学信号对单细胞表面抗原进行高空间分辨成像表征的方法,并且为多抗原的同步表征奠定了基础。目前的研究结果提供了CEA抗原的详细空间信息以及细胞膜上相关的潜在组织机制,这将有助于更好地理解分子聚集及其功能之间的关系,以及细胞膜的整体结构。这对单细胞生物学具有重要意义。
本发明授权单个活细胞表面抗原的超分辨电化学成像方法及装置在权利要求书中公布了:1.一种单个活细胞表面抗原的超分辨电化学成像装置的检测方法, 单个活细胞表面抗原的超分辨电化学成像装置,包括纳米毛细管电极、扫描离子电导显微镜SICM成像系统、AgAgCl电极、电流放大器、控制软件、光学显微镜和数据处理系统;其中, 所述AgAgCl电极包含两根,作为准参比电极;SICM成像系统包括:定位模块,扫描模块和控制模块;其中,所述定位模块与扫描模块连接在一起,所述定位模块包括至少一个电机,用于细胞样品的初步定位;所述扫描模块包括至少一个压电陶瓷;所述控制模块由采集板与控制板组成,所述采集板用于收集电流信号,所述控制板用于控制施加于纳米毛细管电极与细胞样品的电压、电机以及压电陶瓷的运动; 其中所述两根AgAgCl电极,一根置于所述纳米毛细管电极中,一根置于放置待测细胞样品的培养皿上的溶液池中用于扫描,其特征在于,所述检测方法包括以下步骤: 步骤一、制备抗原标记物,将荧光物质和目标抗原对应的抗体利用链霉亲和素-生物素技术得到目标抗原标记物; 步骤二、制备细胞样品,将待测细胞置于培养皿上的培养基中37℃培养,将培养皿从培养箱中取出后洗涤,将细胞在黑暗中固定,得到修饰前细胞样品,向培养皿中加入含有步骤一所述的目标抗原标记物的PBS溶液,孵育30分钟以修饰细胞,PBS溶液洗涤3次后,得到位于培养皿上的修饰后的细胞样品; 步骤三、SICM表征,将步骤二得到的培养皿安装于基底上,基底连接到水平方向的压电陶瓷上;纳米毛细管电极被安装在垂直方向的压电陶瓷上;纳米毛细管电极在光学显微镜的帮助下定位到细胞样品表面特定的位置;利用两根AgAgCl电极作为准参比电极,一根置于所述纳米毛细管电极中,一根置于培养皿上的溶液池中,对所述两根电极之间施加偏电压,获得稳定离子电流,SICM扫描采用hopping模式,完成整个设定区域的扫描,得到细胞样品表面的抗原信息,其中,由扫描离子电导显微镜成像系统得到细胞表面抗原成像信息,根据数据处理系统得到细胞表面抗原含量信息。
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