江南大学周楠迪获国家专利权
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龙图腾网获悉江南大学申请的专利一种DNA腺嘌呤甲基转移酶活性检测方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN116179653B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-10-24发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202211528001.4,技术领域涉及:C12Q1/6844;该发明授权一种DNA腺嘌呤甲基转移酶活性检测方法是由周楠迪;陈灏翰;张雨婷;王晓丽设计研发完成,并于2022-11-30向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种DNA腺嘌呤甲基转移酶活性检测方法在说明书摘要公布了:本发明涉及一种DNA腺嘌呤甲基转移酶活性检测方法,根据底物发卡在DNA腺嘌呤甲基转移酶和限制性核酸内切酶的双酶偶联作用下得到一条截短发夹结构,并设计含有RNA切割型DNA模拟酶互补序列的滚环探针,以截短发卡结构为引物,以滚环探针为模板进行滚环扩增,得到的RNA切割型DNA模拟酶切割分子信标,使修饰在分子信标两端的荧光基团和淬灭基团远离,释放荧光信号,实现DNA腺嘌呤甲基转移酶活性的检测,检测限低至3.09×10‑4UmL,为DNA腺嘌呤甲基转移酶活性分析提供了一种特异性强,灵敏度高的方法。
本发明授权一种DNA腺嘌呤甲基转移酶活性检测方法在权利要求书中公布了:1.一种非诊断DNA腺嘌呤甲基转移酶活性检测方法,其特征在于,包括以下步骤: S1、将底物发卡探针序列变性、复性形成发卡结构,分别将发卡结构与不同活性的DNA腺嘌呤甲基转移酶孵育,孵育后加入限制性核酸内切酶DpnI,继续孵育得到含有切割产物的混合物; S2、以S1得到的切割产物为引物,以含有RNA切割型DNA模拟酶互补序列的滚环探针为模板进行滚环扩增,得到含有扩增产物的混合物; 所述扩增产物为含有RNA切割型DNA模拟酶的序列; S3、向含有扩增产物的混合物中加入分子信标进行孵育,建立荧光信号与DNA腺嘌呤甲基转移酶活性的关系曲线; S4、将待测样品按照S1-S3进行操作,测出荧光强度,根据S3的关系曲线计算出DNA腺嘌呤甲基转移酶的活性; 所述滚环探针的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示,所述底物发卡探针序列的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示,所述分子信标的核苷酸序列如SEQIDNO.3所示,所述分子信标的两端分别修饰有荧光基团和淬灭基团,步骤S1的孵育体系中包括S-腺苷甲硫氨酸。
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