中国科学院动物研究所;北京干细胞与再生医学研究院周琪获国家专利权
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龙图腾网获悉中国科学院动物研究所;北京干细胞与再生医学研究院申请的专利一种实现细胞分化的体外培养法以及由此得到的细胞群及其用途获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN117736990B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-10-24发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202211110084.5,技术领域涉及:C12N5/079;该发明授权一种实现细胞分化的体外培养法以及由此得到的细胞群及其用途是由周琪;李伟;胡宝洋;王昱凯;郝捷;于娟;王柳;田瑶设计研发完成,并于2022-09-13向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种实现细胞分化的体外培养法以及由此得到的细胞群及其用途在说明书摘要公布了:本申请具体涉及一种角膜内皮细胞的获得方法,初始细胞可以为多能干细胞来源,也可以为神经嵴细胞来源。具体地,本申请公开了使用化学成分完全明确的培养基将多能干细胞定向高效地诱导生成角膜内皮细胞。本申请还涉及一种CEC细胞及其在治疗角膜内皮病中的应用。
本发明授权一种实现细胞分化的体外培养法以及由此得到的细胞群及其用途在权利要求书中公布了:1.一种通过体外培养法使多能干细胞分化为角膜内皮细胞CEC的方法,其中,所述方法为两阶段培养法,首先在第一阶段多能干细胞分化为神经嵴细胞NCC,然后在第二阶段神经嵴细胞NCC分化为角膜内皮细胞CEC; 其中,第一阶段使用包括SB431542、CHIR99021和TGFβ2的培养基对多能干细胞进行培养,所述培养基还包括:a基础培养基,以及b谷氨酰胺或L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的稳定化二肽;所述SB431542在培养基中的浓度为1μM-100mM,所述CHIR99021在培养基中的浓度为10nM-100μM,所述TGFβ2在培养基中的浓度为0.1ngml-100μgml; 其中,第二阶段使用包括SB431542、DKK2多肽、SU-5402以及Y-27632的培养基对神经嵴细胞进行培养,所述培养基还包括:a基础培养基,以及b血清替代物、谷氨酰胺或L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的稳定化二肽、胰岛素-转铁蛋白-硒添加剂ITS、非必需氨基酸、L-抗坏血酸和维生素C合剂L-AA;所述SB431542在培养基中的浓度为1μM-100mM,所述DKK2多肽在培养基中的浓度为1ngml-100μgml,所述SU-5402在培养基中的浓度为10nM-10μM,所述Y-27632在培养基中的浓度为10nM-100μM; 其中,在第一阶段,TGFβ2在第6日之后加入。
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