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龙图腾网获悉北京林业大学申请的专利紫薇带芽茎段的遗传转化方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN118792354B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-10-31发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202410811603.3，技术领域涉及：C12N15/84；该发明授权紫薇带芽茎段的遗传转化方法是由潘会堂;王鑫;康佳音;申梦娇;程堂仁;王佳;张启翔设计研发完成，并于2024-06-21向国家知识产权局提交的专利申请。

本紫薇带芽茎段的遗传转化方法在说明书摘要公布了：本发明涉及植物遗传转化技术领域，提供一种紫薇带芽茎段的遗传转化方法，所述方法包括：用含有RUBY报告基因的根癌农杆菌侵染紫薇外植体，并置于共培养培养基中进行共培养，然后将共培养后的外植体转入分化培养基中进行分化培养，将获得的丛生芽接种到生根培养基中，得到遗传转化阳性苗；所述外植体为紫薇组培苗带芽茎段。本发明所用的紫薇茎段相对于叶片，有更高的再生效率，紫薇叶片不定芽诱导率为1.0％‑4.7％，茎段再生增殖系数为5‑20，后期可获得大量阳性植株，且侵染后所有茎段均无褐化现象出现。

本发明授权紫薇带芽茎段的遗传转化方法在权利要求书中公布了：1.紫薇带芽茎段的遗传转化方法，其特征在于，所述方法包括：用含有RUBY报告基因的根癌农杆菌侵染紫薇外植体，并置于共培养培养基中进行共培养，然后将共培养后的外植体转入分化培养基中进行分化培养，将获得的丛生芽接种到生根培养基中，得到遗传转化阳性苗； 其中，所述外植体为紫薇组培苗带芽茎段； 包括如下步骤： 步骤一，将含有RUBY报告基因的表达载体转入根癌农杆菌的感受态细胞中，经活化培养后，挑取阳性菌株经培养后提取菌体，利用侵染液重悬菌体至OD600值为0.6-1.2，于黑暗条件下放置1-2h，得菌悬液； 步骤二，取紫薇组培苗带芽茎段，腋芽保留1-2对，将外植体置于所述菌悬液中真空条件下进行侵染，茎段腋芽朝上斜插入共培养培养基中，黑暗共培养2-3天； 步骤三，将步骤二共培养后的转化受体材料转入分化培养基中，分化培养30-60天后，茎段上获得大量丛生芽； 步骤四，将步骤三获得的丛生芽接种到生根培养基中，得到遗传转化阳性苗； 所述外植体的制备方法为：以紫薇生长35天的无菌组培苗上部茎段为外植体，只留取顶端半片至一片叶子，含有1-2对腋芽，长度为1.0-1.5cm； 步骤一所用侵染液为：10mmolLMES，10mmolLMgCl2·6H2O和200μmolLAS，以无菌水配制； 步骤二所述共培养培养基为：含有0.5mgL6-BA，0.05mgLIBA，30gL蔗糖和7gL琼脂的WPM培养基，pH5.8-6.0； 共培养的条件为：22-24℃，黑暗培养2-3天； 步骤三所述分化培养基为：含有0.5mgL6-BA，0.05mgLIBA，200mgL特美汀，30gL蔗糖和7gL琼脂的WPM培养基，pH5.8-6.0； 分化培养的条件为：22-24℃，光照强度为1500-2000lx，15h光照天，9h黑暗天，交替培养30-60天； 步骤四所述生根培养基为：含有0.3mgLIBA，200mgL特美汀，20gL蔗糖和7gL琼脂的12MS培养基； 生根培养的条件为：22-24℃，光照强度为1500-2000lx，15h光照天，9h黑暗天，交替培养10-30天； 步骤四遗传转化阳性苗的鉴定方法包括：提取紫薇苗DNA，利用检测RUBY报告基因的特异性引物进行PCR扩增，对扩增产物进行电泳检测； 步骤二所述真空条件为：在0.1MPa真空条件下，将带芽茎段置于菌悬液抽真空10-15min进行侵染，侵染温度为25-28℃。

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