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龙图腾网获悉贵州大隆药业有限责任公司申请的专利一种咳宁颗粒止咳祛痰质量标志物的发现方法及质量标志物获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN119780269B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-10-31发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202411881521.2，技术领域涉及：G01N30/02；该发明授权一种咳宁颗粒止咳祛痰质量标志物的发现方法及质量标志物是由刘念宁;李月婷;李勇军;徐卫东;武吉俊;方随换;雷冬梅;卢礼平;陈轻轻;王倩;黄勇;巩仔鹏设计研发完成，并于2024-12-19向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种咳宁颗粒止咳祛痰质量标志物的发现方法及质量标志物在说明书摘要公布了：本发明涉及中药研究技术领域，具体是一种咳宁颗粒止咳祛痰质量标志物的发现方法及质量标志物。本申请通过浓氨水引咳和酚红排泌试验评估咳宁颗粒的止咳、祛痰药效作用，利用UHPLC‑Q‑ExactivePlusOrbitrapHRMS技术开展了咳宁颗粒的血浆药物化学研究，分析鉴定到咳宁颗粒的原型入血成分26个；通过入血成分的网络药理学分析，筛选出咳宁颗粒止咳祛痰的潜在活性成分11个，涉及IL6、TLR4、STAT3等40个共同靶点，主要参与了PI3K‑Akt、HIF‑1、EGFR等信号通路；利用药动学定量分析了7个原型入血成分。通过有效性、传递性、可测性将壬二酸、咖啡酸、香草醛3个化合物作为咳宁颗粒止咳祛痰的质量标志物。本研究结果对于深入明确咳宁颗粒的药效物质基础、优化质量标准以及推动其临床应用具有重要意义。

本发明授权一种咳宁颗粒止咳祛痰质量标志物的发现方法及质量标志物在权利要求书中公布了：1.一种咳宁颗粒止咳祛痰质量标志物的发现方法，其特征在于，包括如下步骤： 1分析鉴定咳宁颗粒的原型入血成分； 2以原型入血成分为“药物成分集”，通过网络药理学方法筛选出咳宁颗粒止咳祛痰的潜在活性成分以及共同靶点； 3基于入血成分分析，利用药动学定量分析原型入血成分的体内过程； 4通过有效性、传递性、可测性最终确定咳宁颗粒止咳祛痰的质量标志物； 所述步骤1分析鉴定咳宁颗粒的原型入血成分，是采用UHPLC-Q-ExactivePlusOrbitrapHRMS方法分析鉴定； 具体色谱条件如下： 色谱柱：CORTECSUPLCT3，规格为2.1mm×100mm，1.6μm；柱温：40℃，流速：0.3mLmin，流动相：流动相A为0.1％甲酸水溶液，流动相B为乙腈甲醇溶液，其体积比为2：1，进样量：2µL，梯度洗脱程序为0～3min，1％→2％B；3～5min，2％→5％B；5～10min，5％→30％B；10～15min，30％→60％B；15～20min，60％→70％B；20～22min，70％→95％B；22～24min，95％B；24～25min，95％→1％B，25～28min，1％B； 具体质谱条件如下： 离子源为电喷雾，喷雾电压为3500V，离子透镜电压频率为50.0；鞘气压力为35arb，辅助气压力为10arb，雾化温度为350℃，毛细血管温度为320℃，探头加热器温度为350℃，扫描模式为全扫描+数据依赖性二级扫描的正负离子交换模式，扫描范围mz80～1200，一级分辨率为70000，二级分辨率为17500； 所述UHPLC-Q-ExactivePlusOrbitrapHRMS方法，待测血浆通过如下方法处理：取血浆500μL，加入100μL1%甲酸水溶液，涡混1min，加入2mL甲醇沉淀蛋白，涡混5min，超声10min，于冷冻高速离心机8000rmin在4℃下离心10min，取上清液置于离心管中，用氮吹仪在37℃下吹干，得残渣，加入200μL50%甲醇复溶，涡旋2min，超声10min，于4℃下12000rmin离心10min，收集上清液作为样品溶液，进UHPLC-Q-ExactivePlusOrbitrapHRMS仪器分析； 所述步骤3，利用药动学定量分析原型入血成分的体内过程，具体条件如下： 色谱条件： 色谱柱：ACQUITYUPLC®BEHC18，规格为2.1×50mm，1.7μm；保护柱：WatersVanGuardBEHC18，规格为2.1×5mm，1.7μm；流动相：A：0.2%甲酸水溶液，B：0.2%甲酸乙腈溶液；流速：0.3mLmin；柱温：40℃；进样体积为1μL；梯度洗脱条件如下： 流动相梯度洗脱表 质谱条件： 电喷雾离子源，毛细管电压3kV，离子源温度120℃，去溶剂气1000LH，去溶剂气温度600℃，碰撞气0.15mLmin；多反应离子监测模式进行正负离子同步监测，各成分监测离子如下： 多反应离子监测质谱条件 所述步骤3，待测样品通过如下方法制备：取血浆200µL，置于1.5mL塑料离心管中，依次加入40ngmL葛根素内标溶液40µL，加入20µL1%甲酸水和800µL乙腈，震荡涡混3min，超声10min，4℃条件下12000rmin离心10min，分离上清液于37℃条件下氮气吹干，残留物用200µL50%乙腈水溶液溶解，涡混3min，超声10min，于4℃条件下14000rmin离心10min，取上清液于ACQUITYUPLCI-ClassXevoTQ-S超高效液相串联三重四极杆联用仪分析。

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