四川菊乐食品股份有限公司;菊乐食品(新津)有限公司;四川菊乐乳业有限公司;四川红原圣舟牦牛乳业有限公司;中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所陈爱亮获国家专利权
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龙图腾网获悉四川菊乐食品股份有限公司;菊乐食品(新津)有限公司;四川菊乐乳业有限公司;四川红原圣舟牦牛乳业有限公司;中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所申请的专利一种基于蛋白组学筛选牦牛乳和犏牛乳差异蛋白标志物的方法及鉴别牦牛乳与犏牛乳中的应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN120741729B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-10-31发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202511262238.6,技术领域涉及:G01N30/02;该发明授权一种基于蛋白组学筛选牦牛乳和犏牛乳差异蛋白标志物的方法及鉴别牦牛乳与犏牛乳中的应用是由陈爱亮;高朝晖;陈曦;张娟;夏雪松;曲崧;伍凯设计研发完成,并于2025-09-05向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种基于蛋白组学筛选牦牛乳和犏牛乳差异蛋白标志物的方法及鉴别牦牛乳与犏牛乳中的应用在说明书摘要公布了:本发明公开了一种基于蛋白组学筛选牦牛乳和犏牛乳差异蛋白标志物的方法及鉴别牦牛乳与犏牛乳中的应用,涉及蛋白质组学及食品检测技术领域。取一部分牦牛乳和犏牛乳的乳清蛋白酶解后的蛋白样本和或乳脂球膜蛋白酶解后的蛋白样本共混,进行超高效液相色谱分级,建立DDA蛋白谱图库;对剩余的蛋白样本分别进行超高效液相色谱‑高分辨质谱串联分析;经过质谱数据分析,鉴定和定量蛋白,筛选出牦牛乳和犏牛乳二者的差异蛋白标志物。通过该方法能够筛选获得牦牛乳与犏牛乳之间的差异蛋白标志物,有助于建立牦牛乳和犏牛乳的鉴别方法,从而实现牦牛乳和犏牛乳的精准、稳定、可重复的判别,有利于保障乳制品质量安全、维护市场秩序。
本发明授权一种基于蛋白组学筛选牦牛乳和犏牛乳差异蛋白标志物的方法及鉴别牦牛乳与犏牛乳中的应用在权利要求书中公布了:1.一种基于蛋白组学筛选牦牛乳和犏牛乳差异蛋白标志物的方法,其特征在于,包括如下步骤: 取一部分牦牛乳和犏牛乳的乳清蛋白经蛋白酶酶解后的蛋白样本和或乳脂球膜蛋白经蛋白酶酶解后的蛋白样本共混,进行超高效液相色谱分级,收集馏分,用甲酸重新溶解后,在DDA模式下进行质谱分析,建立DDA蛋白谱图库;所述超高效液相色谱分级时,以流动相A和流动相B进行线性洗脱;流动相A的组成为:10-20mM甲酸铵的水溶液;流动相B的组成为:乙腈与10-20mM甲酸铵以80-90:20-10体积比的混合物;色谱柱为C18色谱柱;对剩余的蛋白样本分别进行超高效液相色谱-高分辨质谱串联分析; 然后用DIA-NN软件结合蛋白质的鉴定数据库和DDA蛋白谱图库对高分辨质谱结果进行质谱数据分析,鉴定和定量蛋白,获得牦牛乳和犏牛乳的乳清蛋白的蛋白组学数据和或乳脂球膜蛋白的蛋白组学数据,对采集的蛋白组学数据进行化学计量学分析,筛选出牦牛乳和犏牛乳二者的差异蛋白标志物; 超高效液相色谱-高分辨质谱串联分析时,超高效液相色谱以流动相A和流动相B进行梯度洗脱;正离子模式下,流动相A的组成为:含0.1%甲酸以及2%乙腈的水溶液;流动相B的组成为:含0.1%甲酸以及2%水的乙腈溶液;SCIEXM5MicroLC系统,色谱柱为C18色谱柱,C18捕获柱:5μm,100Å,20×0.30mm;C18分析柱:3μm,120Å,0.3×150mm;柱温为40℃;进样量:4μL;流速:5μLmin; 所述梯度洗脱的程序如下: ; 所述高分辨质谱为四极杆飞行时间高分辨率质谱,质谱的条件包括: SCIEXTripleTOFTM6600系统;雾化气为15psi;辅助干燥气为15psi;气帘气为35psi;温度为350℃;喷雾电压:正离子模式5500V;去簇电压:正离子模式80V;高分辨质谱分析时,采用DIA数据采集方法采集数据,全MS扫描在正离子模式下进行,母离子扫描mz:350–1500;子离子扫描mz:100–1500;母离子扫描累积时间:0.1s;子离子扫描累积时间:0.04s,分析时间:60min。
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