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龙图腾网获悉山东杰凯生物科技有限公司;华熙生物科技股份有限公司申请的专利一种基于三维梯度微涡旋与声波流体化协同作用的植物细胞囊泡高效提取方法及其应用获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN120699885B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-11-11发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202511212965.1，技术领域涉及：C12N5/04；该发明授权一种基于三维梯度微涡旋与声波流体化协同作用的植物细胞囊泡高效提取方法及其应用是由李森朋;赵凯;孙美玉;曲文杰;黄福山;刘爽设计研发完成，并于2025-08-28向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种基于三维梯度微涡旋与声波流体化协同作用的植物细胞囊泡高效提取方法及其应用在说明书摘要公布了：本发明公开了一种基于三维梯度微涡旋与声波流体化协同作用的植物细胞囊泡高效提取方法及其应用。本发明提供的植物细胞囊泡提取方法通过活性酶解‑声波裂解‑三维梯度分离全链条工艺，实现了植物细胞囊泡的高得率、高纯度、高活性的提取，能用于大规模生产。该方法克服了传统提取方法得率和纯度低、存在化学污染、提取效率低、囊泡尺寸不可控且结构易破损、时间长等缺陷，可规模化生产制备更多含植物细胞囊泡的化妆品、药品。本发明通过多学科交叉创新声学、流体力学、分子仿生系统性解决了植物囊泡提取与应用的全球性难题，其提取效率高，活性效果好，技术参数全面领先，对于植物细胞囊泡的提取与开发具有重要意义。

本发明授权一种基于三维梯度微涡旋与声波流体化协同作用的植物细胞囊泡高效提取方法及其应用在权利要求书中公布了：1.一种植物细胞囊泡提取方法，其特征在于，包含以下步骤： S1、酶解预处理：将待提取植物样本进行酶解，采用细胞壁降解酶，进行30~38℃水浴，100~150rpm，1~3h，得到植物酶解液； S2、声波流体化裂解：将酶解液转移至反应釜，先15~25kHz频率下进行低频空化，处理3~7min，再切换至0.8~1.2MHz频率下进行高频穿透，处理时间8~12min，得到反应液； 进行声波流体化裂解的具体条件为：先进行低频空化，频率15~25kHz，功率45~55W，脉冲周期3~7s开1~3s关，处理3~7min；再进行高频穿透，切换至0.8~1.2MHz高频，功率密度0.3~0.7Wcm2，聚焦声束直径2~4mm，扫描速度1~3mms，覆盖整个反应釜，处理时间8~12min，同步维持处理温度10℃，得到反应液； 低频空化处理设置的空泡密度不低于105个mL； S3、梯度离心：所用介质溶液为三层不同密度的介质溶液，其中底层溶液采用密度为1.1~2gcm3的高密屏障层溶液、中层溶液采用密度为1.1~1.5gcm3的等渗捕获层溶液、上层溶液采用密度为1~1.5gcm3的低渗保护层溶液，将反应液缓慢加入到三层介质溶液中进行离心，收集中层溶液获得植物细胞囊泡； 离心程序为：第一阶段1800~2200×g，15~25min；第二阶段6000~10000×g，25~35min；第三阶段13000~17000×g，40~50min； 每层介质溶液均通过泛影葡胺、碘克沙醇、蔗糖、海藻糖、Ficoll400、甘露醇、氯化铯、甘油、组氨酸缓冲液、EDTA、胆固醇、皂苷、磷脂、Tris-HCl、NaCl、PBS、超纯水中的至少两种物质制备得到。

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