五峰赤诚生物科技股份有限公司陈赤清获国家专利权
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龙图腾网获悉五峰赤诚生物科技股份有限公司申请的专利利用塔拉粉酶法同步制备没食子酸和奎尼酸的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN115491392B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-11-21发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202211156366.9,技术领域涉及:C12P7/42;该发明授权利用塔拉粉酶法同步制备没食子酸和奎尼酸的方法是由陈赤清;毛业富;刘义稳;龚大春;张子恒;李忠辉设计研发完成,并于2022-09-21向国家知识产权局提交的专利申请。
本利用塔拉粉酶法同步制备没食子酸和奎尼酸的方法在说明书摘要公布了:本发明提供了一种利用塔拉粉酶法同步制备没食子酸和奎尼酸的方法,将黑曲霉种子液发酵,加入诱导底物塔拉粉或塔拉单宁酸进行培养,制备塔拉单宁酶粗酶液,粗酶液催化塔拉粉进行酶解反应,反应后的液体进行超滤,透过液进行2级纳滤处理,二级纳滤的浓缩液加入离子液体进行萃取,得到上层液体和下层液体,上层液体含有没食子酸,下层液体含有奎尼酸;上层液体和下层液体分别用碱中和回收离子液体进行回用;去除离子液体后的上层液体和下层液体分别经冷却结晶,酸化后加入醇类物质进行重结晶,得到没食子酸和奎尼酸。本发明无需活性炭脱色和离子交换吸附等操作,奎尼酸总回收率达到81%以上,没食子酸总回收率达到85%以上。
本发明授权利用塔拉粉酶法同步制备没食子酸和奎尼酸的方法在权利要求书中公布了:1.一种利用塔拉粉酶法同步制备没食子酸和奎尼酸的方法,其特征在于,包括以下步骤: S1、将黑曲霉孢子进行活化制备黑曲霉孢子悬浮液,将悬浮液接种到种子培养基中培养得到种子液,然后加入诱导底物塔拉粉或塔拉单宁酸进行培养,经板框过滤得到塔拉单宁酶粗酶液;诱导底物用量为总培养基的0.5~1.5wt%,培养2~6天,测定塔拉单宁酶的酶活达到12~20UmL时发酵终止,板框过滤得到未反应完的塔拉粉,清液为粗酶液; S2、粗酶液置于生物催化反应器中,加入塔拉粉,进行酶解反应,反应温度30~50℃,酶解时间30~50h,反应后的液体进行超滤,得到的浓缩液用于回收催化用酶,透过液备用; S3、透过液进行二级纳滤处理,一级纳滤的透过液进行二级纳滤,二级纳滤的浓缩液加入离子液体进行萃取,得到上层液体和下层液体,上层液体和下层液体分别用碱中和,得到的上层液体为离子液体,进行回用;2种下层液体经冷却结晶,酸化后加入醇类物质进行重结晶,得到没食子酸和奎尼酸; 所述离子液体为咪唑类离子液体,离子液体与二级纳滤的浓缩液体积比为1:1~1:3;离子液体为混合物,采用苄基-3-甲基咪唑氯盐或1-苄基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐,与1-丁基-3-甲基咪唑溴化物或1-乙基-3-甲基咪唑醋酸盐或1-2-羟基乙基-3-甲基咪唑双三氟甲磺酰基,按质量比1:5~1:10混合制得。
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