南京工业大学董维亮获国家专利权
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龙图腾网获悉南京工业大学申请的专利一种间接表面展示PETase蛋白的重组毕赤酵母获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN115710558B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-11-21发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202211251721.0,技术领域涉及:C12N1/19;该发明授权一种间接表面展示PETase蛋白的重组毕赤酵母是由董维亮;荣欢;姜岷;刘嘉唯;周杰设计研发完成,并于2022-10-13向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种间接表面展示PETase蛋白的重组毕赤酵母在说明书摘要公布了:本发明公开了一种间接表面展示PETase蛋白的重组毕赤酵母,包括:1在毕赤酵母GS115中异源表达3×IM7‑SED1融合蛋白,构建IM7酵母。2在大肠杆菌BL21DE3中异源表达CL7‑PETase融合蛋白,构建CL7‑PETase蛋白。3将IM7酵母和CL7‑PETase蛋白进行结合,实现PETase蛋白在毕赤酵母上的表面展示。本发明采用的间接表面展示的构建方法,克服了直接表面展示系统的表达量不足的缺点,同时与游离酶相比具有稳定性高,分离回收容易,连续操作可控,工艺简便的特点,并且表面展示酶区别于传统的物理或化学的固定化方法,对于PET这种刚性底物,表面展示酶更能充分有效地与底物接触,最大限度催化底物,可作为全细胞催化剂应用于PET塑料降解中的应用。
本发明授权一种间接表面展示PETase蛋白的重组毕赤酵母在权利要求书中公布了:1.一种间接表面展示PETase蛋白的重组毕赤酵母在PET塑料降解中作为全细胞催化剂中的应用,所述重组毕赤酵母是将IM7酵母和CL7-PETase蛋白结合构建得到的, 其中,所述IM7酵母是以毕赤酵母为宿主,异源表达3×IM7-SED1融合蛋白后培养得到的,所述毕赤酵母为毕赤酵母菌PichiapastorisGS115; 其中,所述CL7-PETase蛋白是以大肠杆菌BL21DE3为宿主,异源表达CL7-PETase融合蛋白后培养得到的; 其中,所述的将IM7酵母和CL7-PETase蛋白结合,其结合条件为:在含有10mMCaCl2的100mMTris-HCl缓冲液,pH8.0中4℃孵育8h; 其中,IM7蛋白的核苷酸序列如SEQIDNO:1所示,SED1蛋白的核苷酸序列如SEQIDNO:2所示,CL7蛋白的核苷酸序列如SEQIDNO:3所示,PETase蛋白的核苷酸序列如SEQIDNO:4所示。
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