浙江工业大学柳志强获国家专利权
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龙图腾网获悉浙江工业大学申请的专利一种高产L-半胱氨酸的基因工程菌、构建方法及应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN115806925B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-11-21发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202211335564.1,技术领域涉及:C12N1/21;该发明授权一种高产L-半胱氨酸的基因工程菌、构建方法及应用是由柳志强;杨辉;张博;吴梓丹;潘佳园;陈立峰;郑裕国设计研发完成,并于2022-10-28向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种高产L-半胱氨酸的基因工程菌、构建方法及应用在说明书摘要公布了:本发明涉及一种高产L‑半胱氨酸的基因工程菌、构建方法,及其在微生物发酵制备L‑半胱氨酸中的应用。本发明通过将Esa群体感应系统和乳糖操纵子系统进行整合,构建了一个多功能的QSI动态调控系统,实现了靶基因表达与细胞生长的偶联,并应用到L‑半胱氨酸的生物合成当中,获得了一株高产L‑半胱氨酸的大肠杆菌基因工程菌株。此外,本发明所构建QSI动态控制系统,利用群体感应系统动态地控制乳糖操纵子系统,替代了传统诱导剂IPTG的添加,有效的节约了工业生产的成本和降低了诱导剂IPTG对细胞的毒性影响,具有较好的生产应用价值。
本发明授权一种高产L-半胱氨酸的基因工程菌、构建方法及应用在权利要求书中公布了:1.一种产L-半胱氨酸的基因工程菌,由如下方法构建获得: 1以菌株E.coilW3110为底盘菌株,将其基因组上的lacI基因替换成转录调节因子esaRI70V和AHL合成酶esaI,在基因esaRI70V后添加终止子Tlpd,在基因esaI后添加终止子TrpoC,得到菌株E.coilW3110::esaRI70V::esaIΔlacI;所述转录调节因子esaRI70V的序列如SEQIDNO.1所示,所述AHL合成酶esaI的序列如SEQIDNO.2所示; 2将菌株E.coilW3110::esaRI70V::esaIΔlacI的cysM基因和nrdH基因的启动子替换为PTrc启动子,得到菌株E.coilW3110EYC::esaRI70V::esaI::cysM::nrdHΔlacI; 3将质粒pTrc99a-PTrc-cysE-ydeD-serC-cysB上的基因lacI的启动子替换为PesaS,并在基因lacI的终止密码子前添加LAA降解标签,构建得到发酵质粒pTrc99a-PesaS-lacILAA-PTrc-cysE-ydeD-serC-cysB,其中LAA为降解标签,将其导入步骤2所得菌株中,得到E.coilW3110::esaRI70V::esaI::PTrc-cysM::PTrc-nrdHΔlacIpTrc99a-PesaS-lacILAA-PTrc-cysE-ydeD-serC-cysB,即为所述产L-半胱氨酸的基因工程菌;所述启动子PesaS的序列如SEQIDNO.3所示,降解标签LAA的序列如SEQIDNO.4所示,终止子TrpoC的序列如SEQIDNO.5所示,终止子Tlpd的序列如SEQIDNO.6所示。
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