福建傲芯种业科技集团有限公司;泰和县傲牧育种有限公司;福建哈客生态农业有限公司;福建傲农生物科技集团股份有限公司张蓉获国家专利权
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龙图腾网获悉福建傲芯种业科技集团有限公司;泰和县傲牧育种有限公司;福建哈客生态农业有限公司;福建傲农生物科技集团股份有限公司申请的专利一种猪五体的荧光探针引物、试剂盒及其应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN116121421B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-11-21发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202211737750.8,技术领域涉及:C12Q1/689;该发明授权一种猪五体的荧光探针引物、试剂盒及其应用是由张蓉;沈俊杰;陈秀萍;刘娴;邓政;丁能水;龙毅;谢学范;吴有林设计研发完成,并于2022-12-30向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种猪五体的荧光探针引物、试剂盒及其应用在说明书摘要公布了:本发明公开一种猪五体的荧光探针引物、试剂盒及其应用,其中,猪五体包括猪立克次氏体、猪衣原体、猪肺炎支原体、弓形体、猪钩端螺旋体。本申请选择猪立克次氏体ORF5基因、猪衣原体glgp基因、猪肺炎支原体P95基因、弓形体B1基因、钩端螺旋体CLPS基因的保守序列设计探针引物,本发明试剂盒可以同时进行大批量的样本分析,一次检测即可鉴别样本中是否含有猪肺炎支原体、衣原体、立克次氏体、弓形体、钩端螺旋体,具有简便快捷、稳定性好、灵敏度高、特异性强的特点。
本发明授权一种猪五体的荧光探针引物、试剂盒及其应用在权利要求书中公布了:1.一种试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括阴性对照、阳性对照、引物预混液、探针预混液、PCR扩增液; 所述引物预混液初始浓度为10μM的EPE-F、EPE-R、CS-F、CS-R、MPS-F、MPS-R、TP-F、TP-R、LEP-F、LEP-R摩尔比为1:1:1:1:1:1:1:1:1:1的预混液, EPE-F:5’-TGGGCAGAGATTGCTGGC-3’, EPE-R:5’-TTTTAGGGGTGGGGTGGA-3’, CS-F:5’-CAGGAATGCCGAGAGTTG-3’, CS-R:5’-CTTGGAAATGGGGGGTTA-3’, MPS-F:5’-TCAGGTTGTTTTTTCAGAGC-3’, MPS-R:5’-TAAATTTCCCCCAGTCATTA-3’, TP-F:5’-AACATTCTTGTGCTGCCT-3’, TP-R:5’-TTTCACCTGTATTTGCCA-3’, LEP-F:5’-CACAAACTCCAGACCTAAA-3’, LEP-R:5’-AGTATGTTCGTTATCGTCC-3’; 所述探针预混液包括初始浓度为10μM的EPE-P、CS-P、MPS-P、TP-P、LEP-P摩尔比为1:1:1:1:1的预混液, EPE-P:5’-CCAGGCACCCCTGAAACCTGGTGCG-3’,其中5’端添加报告基团FAM,3’端添加淬灭基团BHQ1, CS-P:5’-CCATAGAATCAAGAAAACATGCTGCT-3’,其中5’端添加报告基团HEX,3’端添加淬灭基团BHQ1, MPS-P:5’-CTTCAGCAGAGGTAAAATTACTATCAGC-3’,其中5’端添加报告基团CY5,3’端添加淬灭基团BHQ2, TP-P:5’-TCCTCTCATGGCAAATGCCAGAAGAAGG-3’,其中5’端添加报告基团ROX,3’端添加淬灭基团BHQ2, LEP-P:5’-ATGAAATTACTGAGGAGTCCACGAAATC-3’,其中5’端添加报告基团CY3,3’端添加淬灭基团BHQ2; 所述阳性对照为含有ORF5基因、glgp基因、P95基因、B1基因和CLPS目的基因片段的重组质粒; ORF5基因的引物探针组的目的序列为: TGGGCAGAGATTGCTGGCCAGGCACCCCTGAAACCTGGTGCGGAGGATTCCAAGCCTGAAGCCGTCCCTTCCTCCATCCACCCCACCCCTAAAA; glgp基因的引物探针组的目的序列为: CAGGAATGCCGAGAGTTGCCATAGAATCAAGAAAACATGCTGCTAATCGACCTAACCCCCCATTTCCAAG; P95基因的引物探针组的目的序列为: TCAGGTTGTTTTTTCAGAGCTTCAGCAGAGGTAAAATTACTATCAGCAAGCTCTAATTTCAGTAATGACTGGGGGAAATTTA; B1基因的引物探针组的目的序列为: AACATTCTTGTGCTGCCTCCTCTCATGGCAAATGCCAGAAGAAGGGTACGTGTTGCATCATAACAAGAGCTGTATTTCCCGCTGGCAAATACAGGTGAAA; CLPS基因的引物探针组的目的序列为: CACAAACTCCAGACCTAAATGAAATTACTGAGGAGTCCACGAAATCAACGGGAGGACCTTGGAGAGTTGTACTTTGGGACGATAACGAACATACT; 所述阴性对照为双蒸水; 所述PCR扩增液为2×AnimalDetectionProbeMasterMix。
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