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龙图腾网获悉吴子平申请的专利一种蝴蝶兰茎尖脱毒组培快繁的方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN118104566B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-11-21发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202410469058.4，技术领域涉及：A01H4/00；该发明授权一种蝴蝶兰茎尖脱毒组培快繁的方法是由吴子平;纪超群;吴若妤;彭金彬;杜志棍;杜碧娥设计研发完成，并于2024-04-18向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种蝴蝶兰茎尖脱毒组培快繁的方法在说明书摘要公布了：本发明属于植物组培领域，公开了一种蝴蝶兰茎尖脱毒组培快繁的方法，包括如下步骤：①待脱毒蝴蝶兰瓶苗所携带病毒摸底，②脱毒蝴蝶兰瓶苗冷热处理，③茎尖剥离液体振荡培养，④茎尖分化诱导，⑤分生苗病毒检测，⑥继代增殖，⑦不定芽生根。本发明提供的一种蝴蝶兰茎尖脱毒组培快繁的方法，首先对待脱毒材料进行病毒摸底，明确茎尖待脱除与待检测的病毒种，解决了因主观认定待检目标病毒而造成可能的其它病毒漏检的共性问题；采用冷热结合预处理待脱毒材料，热处理加快茎尖分生细胞的生长以扩大茎尖不带毒区域，同时冷热处理，钝化病毒，再以0.2～0.5mm的茎尖结合液体培养，通过娴熟茎尖剥离操作保障茎尖脱毒的效果，通过液体振荡培养及添加CPPU保障茎尖细胞的分裂而保障茎尖的成活率，进而解决目前蝴蝶兰茎尖成活率低、脱毒率不高的共性问题。

本发明授权一种蝴蝶兰茎尖脱毒组培快繁的方法在权利要求书中公布了：1.一种蝴蝶兰茎尖脱毒组培快繁的方法，包括如下步骤： 1待脱毒蝴蝶兰瓶苗所携带病毒摸底，随机抽取待脱毒蝴蝶兰瓶苗，取其汁液接种于病毒生物指示植物心叶烟、苋色藜、曼陀萝上，30d后取出现病斑的心叶烟、苋色藜、曼陀萝叶提纯病毒，进行电镜检测观察病毒形态判断病毒种，根据初步判定的病毒种进行相应的PCR检测，进一步确认待脱毒蝴蝶兰所携带的病毒种，并将其作为茎尖分生苗是否脱毒的检测依据； 2脱毒蝴蝶兰瓶苗冷热处理，取待脱毒蝴蝶兰瓶苗置于人工气候箱，每天30℃6h12℃6h，10001ux，培养20d； 3茎尖剥离培养，取冷热处理后的蝴蝶兰，在超净工作台上切取10mm带茎尖的茎段，在连续变倍体显微镜下逐层剥去幼叶，露出圆滑的生长点，截取带1～2个叶原基、长度为0.1～0.5mm的生长点，截取时采取“V”型切法，避免生长点沾上非截取部位的汁液，迅速接入茎尖液体培养基中，26±1℃、300～500lux、12hd、120r连续振荡培养，剥取茎尖时每剥一层幼叶更换一套无菌刀、镊，所述茎尖液体培养基以MS为基础，含有0.1～0.5mgL的CPPU、0.01～0.1mgL的NAA、50～100mgL的VC、50～100mgL的CA、5～15％的椰汁、20gL的蔗糖，pH5.8； 4茎尖分化诱导，茎尖液体振荡培养15～20天，转绿后及时转到茎尖分化诱导培养基上，26±1℃、300～1500lux、12hd培养40～45d；所述茎尖分化诱导培养基以MS为基础，含有2～5mgL的6-BA、0.01～0.1mgL的NAA、50～100mgL的VC、50～150mgL的CA、5～15％的椰汁、20gL的蔗糖、6～7gL的琼脂，pH5.8；茎尖形成的芽团，芽数可达10～40个，无序分布； 5分生芽团病毒检测，取10～15％分生芽团的茎叶汁液接种于病毒生物指标植物心叶烟、苋色藜、曼陀萝上，30d后取接种了分生芽团茎叶汁液的心叶烟、苋色藜、曼陀萝叶及分生芽团茎叶的汁液，进行目标病毒PCR检测与电镜检测，筛选无病毒分生芽团； 6继代增殖，取无病毒的分生芽团，切除褐化老组织，按方向性切割，选取芽高10-25mm、茎2片以上展开叶、叶宽≥5mm、2～3芽团的芽块接入继代增殖培养基中，10团杯，26±1℃、300～1500lux、12hd培养40～45d，芽团增殖率达到3～4；所述继代增殖培养基含有2～4gL的花宝1#、2～3mgL的6-BA、0.1～4mgL的IBA、0.1～0.4mgL的NAA、5～10％椰汁、1～2gL蛋白胨、10～50gL有机物、50～100mgL的VC、50～150mgL的CA、20～30gL糖、5～7gL琼脂，pH5.8； 7不定芽生根，从增殖芽团中切取具有两片展开叶且叶宽均≥5mm、的单芽，接种于不定芽生根培养基中，15株杯，26±1℃、1500～25001ux、12hd培养；所述不定芽生根培养基以MS改为基础，含有70～100gL的香蕉、1～2gL的AC、20～30gL糖、5～7gL琼脂，pH5.8，培养50～60d后，待叶宽均≥30mm、肉质根2～3条时炼苗移栽。

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