上海万何圆生物科技有限公司何爱娜获国家专利权
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龙图腾网获悉上海万何圆生物科技有限公司申请的专利一种粘液性胰腺囊性肿瘤类器官培养方法、检测方法及系统获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119331974B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-11-21发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202411466510.8,技术领域涉及:C12Q1/6886;该发明授权一种粘液性胰腺囊性肿瘤类器官培养方法、检测方法及系统是由何爱娜;魏桂英;牛耿明;徐鹤鸣设计研发完成,并于2024-10-19向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种粘液性胰腺囊性肿瘤类器官培养方法、检测方法及系统在说明书摘要公布了:本发明属于医学技术领域,且公开了一种检测粘液性胰腺囊性肿瘤检测方法及系统,获取胰腺囊液样本;对胰腺囊液进行类器官培养,得到粘液性胰腺囊性肿瘤类器官;获取所述粘液性胰腺囊性肿瘤类器官的细胞形态数据;获取所述粘液性胰腺囊性肿瘤类器官的H&E染色数据和IHC检测数据;获取所述粘液性胰腺囊性肿瘤类器官的免疫荧光检测数据;对粘液性胰腺囊性肿瘤类器官进行scRNA‑Seq测序,完成粘液性胰腺囊性肿瘤的检测,本发明方法可以高效培养类器官,用于在功能上验证恶性细胞的潜在存在。
本发明授权一种粘液性胰腺囊性肿瘤类器官培养方法、检测方法及系统在权利要求书中公布了:1.一种粘液性胰腺囊性肿瘤检测系统,其特征在于,所述检测系统用于区分胰腺假性囊肿和粘液性胰腺囊性肿瘤,所述系统包括: 样本获取单元,所述样本获取单元用于获取胰腺囊液样本; 培养单元,所述培养单元用于对胰腺囊液进行类器官培养,得到粘液性胰腺囊性肿瘤类器官; 细胞形态数据获取单元,所述细胞形态数据获取单元用于获取所述粘液性胰腺囊性肿瘤类器官的细胞形态数据; Hamp;E染色数据和IHC检测数据获取单元,所述Hamp;E染色数据和IHC检测数据获取单元用于获取所述粘液性胰腺囊性肿瘤类器官的Hamp;E染色数据和IHC检测数据; 免疫荧光检测数据获取单元,所述免疫荧光检测数据获取单元用于获取所述粘液性胰腺囊性肿瘤类器官的免疫荧光检测数据; 测序单元,所述测序单元用于对粘液性胰腺囊性肿瘤类器官进行scRNA-Seq测序; 所述免疫荧光检测数据用于判断MUC6、MUC5A在粘液性胰腺囊性肿瘤类器官是否强表达; 所述scRNA-Seq测序数据用于判断MUC6、MUC5A在粘液性胰腺囊性肿瘤类器官是否强表达; 所述细胞形态数据用于判断类器官是否由空泡型慢慢长大增厚,形成致密的球体形态; 所述类器官培养方法包括: 胰腺囊性液体样本收集及处理;所述胰腺囊液样本处理时的清洗液由pbs溶液,0.5%FBS和2%双抗组成; 胰腺囊液类器官培养; 1将胰腺囊液样本从收集管引流袋中转移至50ml离心管中,1:1加入PBS; 24℃,300g,离心5min,弃上清,加入清洗液重悬,用过滤筛进行过滤,继续离心,弃上清; 3如细胞沉淀中有较多红细胞,应进行红细胞裂解;具体操作:细胞沉淀中加入适量红细胞裂解液,吹打混匀,冰浴2~3min,加入等体积清洗液中和;4℃,300g,离心5min,弃上清;如无红细胞则直接进行下一步; 4用1mL的清洗液充分重悬细胞沉淀,再次进行离心前取10µL细胞悬液用于细胞计数,4℃,300g,离心5min,弃上清; 5根据细胞计数情况,确定可接种孔数,在冰浴的条件下,加入适量体积的Matrigel胶充分混匀,在48孔板上控制1*10510uL孔; 6用10µL微量移液器吸取细胞Matrigel胶混合液,按每孔10µL量加入48孔板中央,盖上孔板盖子; 7将48孔板放入37℃,5%CO2细胞培养箱,静置10min,凝固胶液;每孔添加200µL类器官完全培养基,37℃,5%CO2,细胞培养箱培养;每间隔3-4天更换一次培养基; 所述类器官培养的培养基为: 基础培养基:AdvancedDMEMF12;添加的各成分及含量:Primocin100μgmL,HEPES10 mM,GlutaMAX-I1X,A83-01500 nM,Y-2763210 μM,N-acetylcysteine1.56mM,nicotinamide10mM,FGF1010ngmL,B27supplement1X,EGF50 ngmL,GastrinI0.01 μM,Wnt3A条件培养基50 ngmL,R-spondin-1条件培养基250 ngmL,Noggin条件培养基100 ngmL。
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