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龙图腾网获悉中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)申请的专利一种用于区分滑液囊支原体MS-H疫苗株与野毒株的SNP位点、试剂盒及应用获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN119372348B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-11-21发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202411813349.7，技术领域涉及：C12Q1/689；该发明授权一种用于区分滑液囊支原体MS-H疫苗株与野毒株的SNP位点、试剂盒及应用是由祁晶晶;王少辉;赵鹿如;田明星;鲍衍清;胡剑刚设计研发完成，并于2024-12-10向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种用于区分滑液囊支原体MS-H疫苗株与野毒株的SNP位点、试剂盒及应用在说明书摘要公布了：本发明属于生物检测技术领域，具体涉及一种用于区分滑液囊支原体MS‑H疫苗株与野毒株的SNP位点、试剂盒及应用，本发明通过对MS‑H及其亲本株的全基因组进行生物信息学比较分析，筛选出符合检测要求的靶基因。首次对特异性保守基因序列ktrB基因设计特异性引物和MGB探针，建立了区分MS‑H疫苗株与野毒株的双重qPCR试剂盒。经过体外实验证明，本发明的试剂盒操作简单、敏感性高、特异型强、重复性好。本发明所筛选的基因位点及所建立的检测试剂盒，具有规避目前常用基因易发生回复突变的不足，可用于MS疫苗株和野毒株的临床快速诊断，提高了检测的准确性，推进种群净化，具有一定的商用价值。

本发明授权一种用于区分滑液囊支原体MS-H疫苗株与野毒株的SNP位点、试剂盒及应用在权利要求书中公布了：1.一种用于区分滑液囊支原体疫苗株MS-H与野毒株的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤： 1提取待检样本的基因组DNA； 2将阳性标准品质粒从107拷贝μL到100拷贝μL梯度稀释作为模板，以序列如SEQIDNO.5所示的引物ktrB-F及序列如SEQIDNO.6所示的引物ktrB-R进行荧光定量PCR扩增，用于建立标准曲线； 3以步骤1提取的基因组DNA为模板，以特异性引物和探针组合进行荧光定量PCR扩增； 4观察步骤3中荧光定量PCR扩增是否有特征性S曲线，当检测到CY5信号且呈现特征性S曲线判定为MS野毒株，当检测到FAM信号且呈现特征性S曲线判定为MS-H疫苗株，在曲线正常的基础上，根据步骤2中所建立的标准曲线对待检样本中的菌株DNA含量进行定量； 所述荧光定量PCR扩增的反应体系为20μL，含有2×AceQUniversalU+ProbeMasterMixV210μL，10μMMS-ktrB-F0.8μL,10μMMS-ktrB-R0.8μL,10μMMS-ktrB-VP0.4μL,10μMMS-ktrB-WP0.4μL,模板2μL，无菌超纯水5.6μL；所述荧光定量PCR扩增的反应程序为：37℃污染消化2min；95℃预变性5min；95℃变性10s，60℃退火35s，45个循环； 所述特异性引物和探针组合基于基因编号为MSH_02655的ktrB位点进行设计，所述特异性引物包括序列分别如SEQIDNO.1和SEQIDNO.2所示的特异性引物MS-ktrB-F和MS-ktrB-R，所述探针组合包括序列分别如SEQIDNO.3和SEQIDNO.4所示的疫苗株MS-H特异性探针MS-ktrB-VP和MS野毒株特异性探针MS-ktrB-WP； 所述疫苗株MS-H特异性探针MS-ktrB-VP的5’端标记有FAM报告基团，3’端标记有MGB淬灭基团，所述MS野毒株特异性探针MS-ktrB-WP的5’端标记有CY5报告基团，3’端标记有MGB淬灭基团； 所述基因编号为MSH_02655的ktrB位点的具体信息如下所示：

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