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龙图腾网获悉中南大学申请的专利一种基于CRISPR-Cas12a系统检测DNA损伤的电化学方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN119876345B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-11-25发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202510022217.0，技术领域涉及：C12Q1/6825；该发明授权一种基于CRISPR-Cas12a系统检测DNA损伤的电化学方法是由王建秀;闫晓龙;衣馨瑶设计研发完成，并于2025-01-07向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种基于CRISPR-Cas12a系统检测DNA损伤的电化学方法在说明书摘要公布了：本发明公开了一种基于CRISPR‑Cas12a系统检测DNA损伤的电化学方法。正常DNA可激活CRISPR‑Cas12a复合物的活性，导致电极表面固定的DNA探针被切割。被切割的DNA探针在发卡DNAH1和H2存在下不能发生HCR反应，从而产生较小的亚甲基蓝的电化学信号；损伤DNA不能完全激活CRISPR‑Cas12a复合物的活性，此时，未切割的DNA探针在发卡DNAH1和H2存在下诱发HCR并产生较长的双链DNA，大量亚甲基蓝分子与双链DNA结合，从而产生较强的电化学信号。DNA的损伤程度对应于其光损伤水平，亚甲基蓝的电化学信号与DNA光损伤水平在0.021‑0.42kJm‑2范围内呈线性关系，最低检测限为0.0088kJm‑2。

本发明授权一种基于CRISPR-Cas12a系统检测DNA损伤的电化学方法在权利要求书中公布了：1.一种基于CRISPR-Cas12a系统检测DNA损伤的电化学方法，其特征在于，包括以下步骤： S1.获取待测DNA核苷酸序列，构建样本DNA；将若干个样本DNA在紫外灯下分别照射预设时间，得到一组不同损伤程度的样本DNA；将Cas12a与crRNA混合孵育，生成Cas12acrRNA复合物，随后向其中分别加入不同损伤程度的样本DNA并且孵育，得到一组不同激活程度的CRISPR-Cas12a复合物； S2.将金电极抛光后，在电极表面滴加巯基化的DNA探针和TCEP三2-羧乙基膦混合物进行孵育；用水和乙醇分别清洗电极表面并吹干后，滴加6-巯基-1-己醇进行孵育；再用水和乙醇分别清洗电极表面并吹干后，分别滴加步骤S1得到的不同激活程度的CRISPR-Cas12a复合物进行孵育，得到一组预处理电极； S3.向步骤S2得到的一组预处理电极上滴加发卡DNAH1和H2的混合物，进行HCR反应，反应完成后，清洗电极并吹干，滴加亚甲基蓝溶液并孵育，得到一组亚甲基蓝处理电极； S4.将步骤S3得到的一组亚甲基蓝处理电极通过差分脉冲伏安法，采用三电极体系在PBS中测试亚甲基蓝的电化学信号，得到DNA的光损伤水平与亚甲基蓝的电化学信号的关系； S5.根据步骤S4得到的DNA的光损伤水平与亚甲基蓝的电化学信号的关系，对待测DNA进行处理，得到待测DNA的光损伤水平； 步骤S5包括以下步骤： A.制备Cas12acrRNA复合物，再加入待测DNA进行孵育，得到激活的CRISPR-Cas12a复合物； B.将金电极抛光，滴加巯基化的DNA探针和TCEP三2-羧乙基膦混合物，孵育并过夜，用水和乙醇分别清洗电极表面并吹干后，滴加6-巯基-1-己醇进行孵育；再用水和乙醇分别清洗电极表面并吹干后，滴加步骤A得到的激活的CRISPR-Cas12a复合物进行孵育，得到预处理电极； C.向步骤B得到的预处理电极上滴加发卡DNAH1和H2，进行HCR反应，反应完成后，清洗电极并吹干，滴加亚甲基蓝溶液并孵育，得到亚甲基蓝处理电极； D.根据步骤S4得到的DNA的光损伤水平与亚甲基蓝的电化学信号的关系，将步骤C得到的亚甲基蓝处理电极通过差分脉冲伏安法，采用三电极体系在PBS中测试亚甲基蓝的电化学信号，得到待测DNA的光损伤水平； 所述光损伤来源为紫外光辐射。

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