西北农林科技大学王丽获国家专利权
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龙图腾网获悉西北农林科技大学申请的专利一种微生物纳米酶探针、检测沙丁胺醇的试纸条及其应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN114518457B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-11-28发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202111504287.8,技术领域涉及:G01N33/58;该发明授权一种微生物纳米酶探针、检测沙丁胺醇的试纸条及其应用是由王丽;赵爽;何坤益;补彤;白菲儿;杨铠溶设计研发完成,并于2021-12-10向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种微生物纳米酶探针、检测沙丁胺醇的试纸条及其应用在说明书摘要公布了:本发明公开了一种微生物纳米酶探针、检测沙丁胺醇的方法及应用,包括沙丁胺醇单克隆抗体和信号载体,所述的信号载体为负载氧化铱纳米粒子的酵母细胞。本发明首次在免疫层析试纸条检测中以负载氧化铱纳米粒子的酵母细胞构建探针,使用[3,3',5,5'四甲基联苯胺TMB和过氧化氢H2O2]作为底物触发显色反应,可实现高灵敏目标物检测,检测限低至0.012ngmL,与传统金标试纸条的灵敏度相比提高55倍。此外,本发明具有很好的应用前景,可以为为灵敏、精确和快速检测食源性兴奋剂提供了一个通用平台。同时,能成功应用于猪肝和牛肉样品中的沙丁胺醇检测。
本发明授权一种微生物纳米酶探针、检测沙丁胺醇的试纸条及其应用在权利要求书中公布了:1.一种微生物纳米酶探针,其特征在于,所述探针的信号载体为负载氧化铱纳米粒子的酵母细胞;所述的酵母细胞为长2~3μm和宽1~2μm的椭球体;所述的氧化铱纳米粒子粒径为17~21nm; 利用所述的信号载体标记单克隆抗体;具体包括:制备氧化铱纳米粒子溶液,灭活的酵母细胞于氧化铱纳米粒子溶液中负载氧化铱纳米粒子,然后再进行单克隆抗体吸附即得; 所述的制备氧化铱纳米粒子溶液包括:按质量比为5:3,将柠檬酸三钠和KIrCl混合制备成溶液,将溶液的pH调节至7.5,并在沸腾下回流;当溶液的颜色从棕色变为钢灰色时,继续搅拌溶液并加热30分钟;待溶液冷却至室温后,将pH重新调节至7.5,然后将溶液加热30分钟直至pH稳定,直至溶液的颜色变为深蓝色; 制备灭活的酵母细胞溶液:酵母细胞在酵母提取物蛋白胨葡萄糖培养基中于28℃培养18h,通过离心收集酵母细胞并将酵母原液稀释OD600至2; 制备负载氧化铱纳米粒子的酵母细胞:将制备好的氧化铱纳米粒子溶液与灭活的酵母细胞溶液溶液在37℃下混合10分钟; 制备微生物纳米酶探针:将单克隆抗体加入负载氧化铱纳米粒子的酵母细胞溶液中混合,用牛血清蛋白封闭,离心重悬于超纯水中; 单克隆抗体与负载氧化铱纳米粒子的酵母细胞混合,混合比为4μg:1mL;混合时间为0.8~1.2h,添加牛血清蛋白的封闭时间为20~40min,终浓度为1%。
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